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褐飞虱(Nilaparvata lugens (Stal))属同翅目,飞虱科,是水稻上的主要害虫。RNAi在昆虫上成功的应用于鉴定多种基因的功能。这项技术在害虫防治领域也取得了一定进展。精氨酸激酶是调节无脊椎动物能量代谢的重要酶之一。磷酸精氨酸中的高能磷酸键在精氨酸激酶的作用下被转移形成ATP。褐飞虱精氨酸激酶(Arginine Kinase, AK)编码区共编码357个氨基酸,全长1071bp,根据活性区域motif CPTNLGT选择了ak基因包括的333bp核苷酸片段构建dsRNA片段。扩增带T7启动子的AK活性区正义链和反义链后利用in vitro Transcription T7Kit体外合成dsRNA,利用包含该段dsRNA的人工饲料饲喂褐飞虱进行生物活性测定。初步结果表明：持续饲喂人工饲料2d后,褐飞虱在饲喂含有ak dsRNA的人工饲料后,开始死亡。8d后,死亡率达到了81.5%。由于双链RNA表达抑制转化载体pds1301能够在植物中表达双链RNA,因此构建重组表达质粒,通过农杆菌侵染水稻愈伤组织的方法以获得表达褐飞虱ak-dsRNA的转基因水稻植株。电转化农杆菌EH105菌株后,利用PCR鉴定农杆菌转化子。以磷酸潮霉素转移酶基因为筛选标记,经过潮霉素筛选后,最终得到再生苗移栽到温室培养。通过对标记基因的检测,RT-PCR检测插入片段,得到抗性植株16株,PCR阳性植株3株,阳性率为3.7%。