研究背景各种形式的终末期肾病，无关他们的病因是什么，进行性的肾间质纤维化和肾小管萎缩是其共同的病理特征。肾间质纤维化由炎性因素促发，继之出现肾小管上皮细胞向间充质细胞转化。早期的抗炎治疗策略对于预防肾间质纤维化的进程及其重要。然而目前还没有有效的治疗策略可以采用，因此，寻找新的治疗靶点及其紧迫。持续损伤后的肾脏炎症，例如IgA肾病和狼疮性肾炎，作为启动因素，建立了纤维化的舞台，促发了组织纤维化的发生。在这个病理过程中，炎性细胞，如单核巨噬细胞和淋巴细胞发挥了重要作用。肾间质纤维化特点就是肌成纤维细胞的激活和基质蛋白的沉积，主要包括I型胶原和III型胶原。在肾间质纤维化的病程中，通过EMT产生了大量的表达α-SMA肌成纤维细胞，其是基质蛋白的主要来源。单侧输尿管梗阻（UUO）模型一直被用来阐明肾间质纤维化的发生机制。单核巨噬细胞和淋巴细胞的浸润及淋巴细胞的功能失常在UUO诱导的肾间质纤维化的模型中起重要的致病作用。在这个模型中，细胞水平上，肾小管扩张导致肾小管上皮细胞失去上皮细胞的特点，并获得间充质细胞性状，如α-SMA的表达和肌动蛋白的重组。因此，肾小管上皮细胞通过EMT过程成为肾肌成纤维细胞的主要来源。在分子水平上，TGF-β1通过激活其下游的Rho/ROCK信号传导通路在EMT中起着关键的作用。最近，腺苷A_2A的受体(A_2AR)作为一种新的炎症调节因子调控炎症过程和组织修复。药理学研究表明，A_2AR激动剂CGS21680和ATL193，可以有效地抑制炎症，激活A_2AR导致肾小球肾炎和肾脏损伤的减轻。此外，最近的研究发现，在肝星状细胞，激活A_2AR可以抑制Rho/ROCK1。以上所有表明，调控A_2AR对炎症、EMT事件起着重要的调节作用。因此，我们推测，激活A_2AR可以抑制炎症细胞浸润，EMT事件和促纤维化因子，从而防止随之而来的肾间质纤维化。相反，A_2AR失活可能导致肾间质纤维化恶化。使用UUO引起的肾间质纤维化实验小鼠模型，我们从多方面评估了A_2AR在肾间质纤维化中的调节作用，包括间质淋巴细胞浸润，细胞EMT的生物标志物，促纤维化*本课题为国家自然科学基金资助项目. No30871170因子TGF-β1的表达及其下游Rho/ROCK1途径，以及由此产生的细胞外基质的积累。研究目的明确腺苷A_2AR对单侧输尿管梗阻（UUO）小鼠肾间质纤维化表型的影响。探讨腺苷A_2AR影响肾间质纤维化的分子机制。方法建立C57背景小鼠肾间质纤维化动态模型，采用HE染色、Masson染色、免疫组化对UUO术后3天、7天、14天三个时间结点进行病理学检测及纤维化程度进行评估，计算机辅助图像分析用于评估肾间质纤维化情况及炎性细胞浸润情况。药理学干预实验，研究腺苷A_2AR对不同处理组表型的影响，采用敲除腺苷A_2AR及CGS21680激活腺苷A_2AR，对三个时间结点的不同处理组，包括假手术对照组、野生型+梗阻组、A_2AR激活+梗阻组、A_2AR敲除+梗阻组表型进行分析，明确A_2AR对肾间质纤维化表型的影响。进一步明确腺苷A_2AR影响肾间质纤维化的分子机制，使用Western-blot、免疫组化对影响肾间质纤维化的关键环节，肾小管上皮细胞向间充质细胞转化（EMT）进行检测。动态监测肾小管上皮细胞标志E-cadherin及肌成纤维细胞的表面标志α-SMA的变化。免疫组化明确EMT启动因素炎症细胞浸润的种类，image pro plus计算机辅助图像定量分析，分析A_2AR对不同组别细胞浸润的影响。使用RT-qPCR检测腺苷A_2AR对致纤维化因子TGF-β1和RHO/ROCK1信号途径的影响。结果激活腺苷A_2AR减轻了细胞外基质胶原的沉积。激活腺苷A_2AR抑制了EMT的进程。激活腺苷A_2AR减少了促纤维化因子的表达。腺苷A_2AR介导的肾间质纤维化保护作用源于激活腺苷A_2AR抑制了T淋巴细胞的浸润。与之相反的是，A_2AR失活将对以上表型，发挥完全相反的作用。结论本研究首次在小鼠UUO模型中证实了激活A_2AR阻止肾间质纤维化的保护作用，靶向调控A_2AR是防治肾间质纤维化的又一个新的治疗策略。