益肾化瘀方治疗CKD2-4期患者临床观察及对肾间质纤维化干预的实验研究

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目的:通过益肾化瘀方治疗CKD2-4期患者的临床疗效观察及益肾化瘀方含药血清对HK-2细细E-cadherin、α-SMA表达干预作用的实验研究,客观评价益肾化瘀方的临床疗效,阐明益肾化瘀方干预肾间质纤维化的部分作用机理,为临床应用提供科学的理论及实践依据。方法:1.临床观察:收集2017年4月-2018年3月就诊于河南中医药大学第一附属医院肾内科患者共60例,并且均符合慢性肾脏病(CKD)2-4期的西医诊诊标诊以及肾虚血瘀证的中医证候诊诊标诊。采用随机、对照的研究方法,将60例受试者分为治疗组和对照组,各30例。对照组予指南推荐标诊治疗,治疗组予益肾化瘀方水煎剂联合标诊治疗,观察12周。对比治疗前后患者的肾功能、血常规、肝功能和电解质结果,计算肌酐清除率(CCr)水平,并记录治疗前后中医证候积分。2.动物实验:将SD大鼠灌胃后制备含药血清。而后将在培养板中生长融合至80%的HK-2细细随机分为6组:正常对照组,AngⅡ刺激组,5%、10%、20%益肾化瘀方含药血清组及缬沙坦含药血清组。刺激12h、24h、48h后,采用免疫细细化学法分别检测各组细细中α-SMA、E-cadherin的表达情况。结果:1.益肾化瘀方对CKD2-4期肾虚血瘀证患者临床疗效的研究(1)两组患者在治疗前SCr、BUN、UA、HGB、CCr水平差异不明显(P>0.05)。(2)治疗后两组患者的中医症状积分较治疗前均明显下降(P<0.05),且治疗组优于对照组(P<0.05)。(3)治疗后两组患者SCr、BUN均得到有效降低,CCr水平得到提升,且治疗组优于对照组(P<0.05)。但两组患者血UA水平变化均不大(P>0.05)。(4)治疗后两组患者HGB均得到提高,但差异不明显(P>0.05)。(5)12周后治疗组的临床总有效率为93.33%,对照组为80.00%,差异明显(P<0.05)。(6)两组患者的AST、ALT、血清K+、PLT治疗前后均无明显改变,且治疗组患者在观察过程中未见明显的不良药物反应。2.益肾化瘀方含药血清对HK-2细细E-cadherin、a-SMA表达的干预作用(1)三个时间点中正常对照组E-cadherin阳性表达最高,AngⅡ刺激组阳性表达最低。与AngⅡ刺激组相比,除24小时和48小时中5%益肾化瘀方含药血清组表达量稍低(P>0.05),余各含药血清组在各个时间点均明显提高(P<0.05),其中益肾化瘀方各剂量组,以20%益肾化瘀方含药血清组最为明显,差异显著(P<0.05)。(2)三个时间点中正常对照组a-SMA阳性表达量最低,AngⅡ刺激组阳性表达最高。同一组中,均随着时间的延长,a-SMA表达量逐渐增多。与AngⅡ刺激组相比,各药物干预组在各时间点表达量均降低,其中益肾化瘀方各剂量组,以20%益肾化瘀方含药血清组最为明显,差异显著(P<0.05)。结论:1.益肾化瘀方能够有效改善CKD2-4期患者的肾功能,且能够有效减轻患者临床症状,可以有效控制CKD的发展。2.益肾化瘀方含药血清可以升高E-cadherin在HK-2细细中的表达,减低a-SMA的表达,发挥干预肾间质纤维化的作用。
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