两株益生菌在凡纳滨对虾生物絮团养殖中的应用

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益生菌在提高养殖对虾产量、调控水质、提高对虾免疫力等方面的功能已得到普遍公认。生物絮团是近几年来得到世界范围内认可的生态养殖模式,该养殖方式不仅可以有效降低养殖水体中的有害无机氮净化水质,还可以为养殖对虾提供营养物质,提高对虾非特异性免疫能力及抗病性。本实验从对虾养殖池中分离鉴定,并通过筛选获得一株具有高效脱氮能力的细菌,并将其添加进养殖水体通过添加碳源调节C/N形成生物絮团。主要研究结果如下:1、一株异养硝化反硝化细菌的筛选鉴定及其特性的研究。采用富集培养和分离纯化等方式,从对虾养殖池中筛选出一株具有硝化反硝化能力的细菌。通过形态观察、16S rRNA测序分析该菌株与Bacillus megaterium相似度高达99%。将该菌株为巨大芽孢杆菌命名为201205311-D-3。通过该菌株在不同温度、pH和盐度下生长得出该菌株的最适生长温度为30℃,最佳生长盐度为25,最适pH为8.0。通过该菌株在不同氮源培养基中生长及其对各种无机氮的去除效果发现,该菌株最以按氨氮为唯一氮源的培养基中生长最好。在分别以氨氮、亚硝氮和硝氮为唯一氮源的培养基中对各种无机氮的去除率分别为(91.33±0.41)%、(87.53±0.68)%、(79.79±0.34)%。在三种氮源同时存在的培养基中,该菌株最先利用氨氮。该实验结果表明菌株201205311-D-3具有高效硝化反硝化能力,并适宜应用在对虾养殖水环境中。2、两株单一菌株对凡纳滨对虾幼虾存活率及抗WSSV的影响将巨大芽孢杆菌201205311-D-3和美丽盐单胞菌201107270102添加进养殖水体中使水体中细菌的浓度达1×106cfu/mL,将两种菌包裹于饲料中投喂凡纳滨对虾幼虾。以这两种方式处理投喂20天后,统计幼虾成活率,并投喂WSSV病料进行攻毒感染,14天后统计幼虾死亡率。实验结果表明:两种处理对虾幼虾存活率均高于对照组,添加美丽盐单胞菌201107270102组对虾幼虾对虾成活率最高(74.17±1.18)%。各处理组对对虾幼虾均有抗WSSV作用,添加巨大芽孢杆菌201205311-D-3组对WSSV相对保护率最高56.67%,显著高于其他各组和对照组(P<0.05)。添加巨大芽孢杆菌和美丽盐单胞菌以及将两种菌包裹进饲料投喂均可显著提高对虾幼虾抗WSSV感染能力。3、两株特定功能益生菌在凡纳滨对虾生物絮团养殖中的应用为研究两种菌在凡纳滨对虾生物絮团养殖中的作用,将巨大芽孢杆菌和美丽盐单胞菌以及两种菌等量混合加入到凡纳滨对虾养殖水体中,并添加赤砂糖作为有机碳源,培养生物絮团,并换水正常养殖和不换水正常养殖作为对照处理。结果表明,添加碳源和细菌的生物絮团养殖组生物絮团生成量显著高于对照组(P<0.05),其中混合菌株添加的效果更佳。添加有机碳源和细菌的生物絮团养殖组能够降低养殖水体中的氨氮和亚硝氮含量,提高凡纳滨对虾成活率,促进对虾的生长。
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