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本研究分两个步骤进行:1.探索在石蜡切片上进行直接法原位PCR的可行性。2.探讨霍奇金淋巴瘤(Hodgkins Lymphoma,HL)H/R-S细胞的克隆性及与周围淋巴细胞的相关性。
方法:1.采用免疫组化(Envision),对3例霍奇金淋巴瘤石蜡组织中的H/R-S进行IgL(k,λ)抗体表达的检测。2.在IgL(k,λ)抗体免疫组化检测基础上,应用5标记引物直接原位PCR方法,对3例CHL(包括2例MCHL和1例NCHL)福尔马林固定石蜡包埋组织切片经蛋白酶K消化处理后,采用生物素标记的λ家族特异性引物进行原位扩增,扩增产物经DAB显色后,显微镜下观察结果,综合分析。
结论:1.在石蜡切片上进行直接法原位PCR是可行和有效的。2.H/R-S细胞存在IgL基因重排,进一步证实CHL的H/R-S细胞来源于不同分化阶段的B细胞。3.两例MCHL同时出现Vλ3a、Vλ7基因重排,一定程度上说明MCHL的H/R-s的多克隆性。4:背景的部分小淋巴细胞核内也出现阳性信号,提示与相应的H/R-S细胞存在相关性,可能为同一B细胞来源。