本研究采用流式细胞术(FCM)和免疫荧光技术对甲状腺癌、结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤的DNA含量(DI值)、细胞增殖活性(PI值)及CyclinD1、CDK4、Rb、p27、bcl-2、PCNA基因蛋白表达进行定量检测，旨在探讨DNA含量、细胞增殖活性及CyclinD1CDK4、Rb、p27、bcl-2、PCNA基因表达在不同甲状腺肿瘤发生发展中的变化，从而为临床上甲状腺肿瘤的鉴别诊断、治疗提供理论指导。 研究方法：本试验标本取自河北医科大学附属四院及唐山工人医院病理科1999至2004年手术切除标本的石蜡包埋组织块，其中甲状腺癌40例，甲状腺腺瘤16例，结节性甲状腺肿21例，正常甲状腺组织10例为对照。 1.将组织制成单细胞悬液，用碘化丙锭(PI)和RNA酶对细胞DNA进行荧光染色后，测定其DNA含量，以DNA指数(DI值)表示含量，以增殖指数(PI值)表示细胞增殖活性。 2.分别用CyclinD1、CDK4、Rb、P27、bcl-2、PCNA的单克隆抗体对所测组织进行细胞免疫荧光染色，采用流式细胞术检测细胞的CyclinD1、CDK4、Rb、P27、bcl-2、PCNA基因的蛋白表达，以荧光指数(FI)作为定量表达指标。 研究结果： 1.甲状腺癌的DI值明显高于结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织(P＜0.01)。结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织的DI值差异无显著性(P＞0.05)；甲状腺癌的异倍体细胞明显增多，异倍体率为80.0％，与结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织的差异有显著性(P＜0.01)。甲状腺癌的PI值明显高于结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和正常甲状腺组织(P＜0.01)，结节性甲状腺肿和甲状腺腺瘤的PI值差异无显著性(P＞0.05)。 2.甲状腺肿瘤CyclinD1表达量均高于正常甲状腺组织，甲状腺癌的FI值显著高于结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤、正常甲状腺组织(P＜0.01)，而结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤、正常甲状腺组织之间的FI值差异无显著性(P＞0.05)。Rb基因在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中表达量(FI值)分别依次减少，但差异无显著性(P＞0.05)。 3.CDK4基因蛋白表达随细胞异型性的增高而不断增高，正常细胞组与甲状腺癌组差异具有显著性(P＜0.01)。P27基因蛋白表达在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中表达的FI值分别依次减少，随细胞异型性的增高而逐渐减少(见表-4)，在癌细胞组减少最明显，甲状腺癌、甲状腺腺瘤和结节性甲状腺肿FI值均明显低于正常甲状腺组织(P＜0.01)，前三者间FI值差异无显著性(P＞0.05)。 4.bcl-2基因蛋白表达在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中表达的FI值分别依次增加，甲状腺癌与其他各组间差异具有显著性(P＜0.01)。PCNA基因蛋白表达在甲状腺癌中明显高于正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤。与其他各组间差异具有显著性(P＜0.01)。 研究结论： 1.DNA含量和增殖指数在甲状腺癌显著高于正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤，DNA含量和增殖指数可作为鉴别肿瘤良恶性的标志物。 2.CyclinD1、PCNA在甲状腺癌中的表达显著高于正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤，说明CyclinD1、PCNA可能通过加快细胞增殖周期参与了肿瘤的形成。CDK4基因蛋白表达在正常细胞组与甲状腺癌组差异具有显著性.说明CDK4高表达与甲状腺肿瘤发生密切相关。 3.P27基因在甲状腺癌、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤中呈低表达，说明p27低表达与甲状腺增生性病变的发生密切相关。Rb基因在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中表达分别依次减少。bcl-2基因蛋白表达在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中表达的FI值分别依次增加(见表5)，结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤、正常甲状腺组织与甲状腺癌组差异具有显著性(P＜0.01)。