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农药因其能够有效控制病虫害提高产量而广泛应用于农林业,然而农药对非目标生物也具有毒性作用。长期和短期接触农药可诱导一般毒性、神经毒性、生殖毒性以及免疫毒性。本研究选取六种不同化学组成的常见中低毒性农药:毒死蜱(CPF)、杀螟硫磷(FNT)、马拉硫磷(MLT)、百草枯(PQ)、氰戊菊酯(FEN)和毒杀芬(PCC),研究其免疫毒性。首先通过测定脾细胞、脾T、脾B淋巴细胞活力和脾T淋巴细胞分泌的白细胞介素-2水平,评估六种农药的免疫毒性作用,通过测定脾细胞内活性氧(ROS)、非酶和酶促抗氧化剂水平,初步研究农药的免疫毒性作用机制。主要研究结果如下:(1)研究不同农药对脾细胞活力的影响。将小鼠脾细胞暴露于不同浓度(10.6M、10-5M、104 M)CPF、FNT、MLT、PQ、FEN 和 PCC,采用 MTT 法测定细胞活力,结果发现六种实验农药均以浓度依赖方式抑制脾细胞增殖,在10.4 M暴露浓度下抑制作用显著。对脾细胞增殖毒性由强到弱依次为PCC、MLT、CPF、PQ、FNT、FEN。(2)研究不同农药对脾淋巴细胞亚群的影响。用有丝分裂原伴刀豆球蛋白刺激培养T淋巴细胞,用脂多糖处理培养B淋巴细胞。用10-4 M浓度的不同农药与有丝分裂原伴刀豆球蛋白A或脂多糖共同处理脾淋巴细胞,结果发现FNT、MLT、FEN和PCC选择性抑制脾T淋巴细胞活力,CPF选择性抑制脾B淋巴细胞活力,而PQ对脾T、B淋巴细胞活力均有显著抑制作用。对T淋巴细胞增殖毒性由强到弱依次为PCC、MLT、FNT、FEN、PQ,对B淋巴细胞增殖毒性由强到弱依次为PQ、CPF。(3)研究不同农药对脾细胞功能的影响。通过酶联免疫吸附试验测定不同农药(10-5M、10-4M)处理下脾T淋巴细胞分泌的白细胞介素-2水平,结果表明六种农药均以浓度依赖方式抑制脾淋巴细胞分泌细胞因子功能,在10-4 M浓度下抑制脾T淋巴细胞功能显著。对T淋巴细胞功能抑制作用由强到弱依次为PQ、FEN、PCC、CPF、FNT、MLT。(4)农药诱导脾细胞免疫毒性机制的初步研究。通过测定细胞内活性氧和非酶抗氧化剂还原型谷胱甘肽(GSH)水平,以及酶促抗氧化剂谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,研究农药毒性与其诱导产生的氧化应激之间的关系,结果表明除CPF外其它五种农药均诱导脾淋巴细胞细胞产生过量活性氧;六种农药均显著降低细胞内GSH水平;除FEN外均对GSH-Px活力有显著抑制作用;MLT、PCC和CPF均对GR活力有显著抑制作用;除PQ外均对GST活力有显著抑制作用;除PQ和CPF外均对SOD活力有显著抑制作用。提示六种农药的免疫毒性均与其诱导产生的氧化应激具有密切关系。上述结果表明,农药CPF、FNT、MLT、PQ、FEN和PCC均对脾淋巴细胞具有免疫毒性,其免疫毒性与其诱导的氧化应激具有密切的关系。