石榴籽油对人前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡机制的初步研究

来源 :内蒙古医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cshuangyong
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目的:研究石榴籽油(Pomegranate seed oil,PSO)对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响,初步探讨PSO抗前列腺癌的作用机制。  方法:(1)培养前列腺癌PC-3细胞,采用MTT法检测PSO在不同浓度(0、50、100、200、400、800、1000μg/mL)、作用不同时间(24、48、72h)对PC-3细胞增殖的影响,并计算其IC50。(2)用Hochest33258染色及Annexin V/PI双染检测PSO对PC-3细胞凋亡的影响,并计算其凋亡率。(3)用流式细胞仪检测PC-3细胞周期的变化。(4)Real-Time PCR测定不同浓度PSO处理后,各组PC-3细胞中Bax、Bcl-2mRNA表达量的变化。(5)Western blotting技术检测给予PSO,PC-3细胞Bax、Bcl-2、p53蛋白表达水平的变化。  结果:(1)MTT法结果显示PSO能以浓度依赖性方式有效的抑制PC-3细胞增殖,PSO抑制PC-3细胞增殖的IC50约为486μg/mL。(2)Hochest33258染色结果显示给予PSO后,部分PC-3细胞的细胞核浓缩,呈月牙形或碎裂成多个球形颗粒,100、200、400μg/mL的PSO处理后,PC-3细胞与对照组相比,均具有显著性差异(p<0.01)。Annexin V/PI双染结果同样显示,各浓度组与对照组相比,差异具有统计学意义(p<0.01)。说明PSO能以浓度依赖性方式诱导PC-3细胞凋亡。(3)PSO能增加PC-3细胞G1期百分率,降低PC-3细胞S期百分率,使细胞周期停滞在G0/G1期,细胞增殖指数下降。(4)Western blotting显示PSO可以上调p53蛋白的表达。Real-Time PCR和Western blotting同时显示PSO抑制Bcl-2mRNA和蛋白的表达,促进Bax mRNA和蛋白的表达。  结论:(1)PSO能以浓度依赖性方式抑制PC-3细胞的增殖;(2)PSO能以浓度依赖性方式促进PC-3细胞的凋亡;(3)PSO可以调控PC-3细胞周期,PSO可能通过上调Bax和p53的表达水平,下调Bcl-2表达水平,进而诱导细胞凋亡来抑制肿瘤细胞增殖。
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