日粮色氨酸水平对感染伪狂犬病毒妊娠雌鼠繁殖性能和免疫功能的影响

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母体的免疫特别是Th1/Th2平衡对妊娠成功与否起决定作用,母体感染疾病后Th1型促炎症细胞因子增加,破坏Th1/Th2平衡不利于妊娠,而色氨酸的代谢产物可以调控Th1和Th2细胞因子的比例,从而影响繁殖。因此,本研究以妊娠雌鼠为模型,以动物繁殖性能(死亡率、流产率、活胚数、分娩活仔数)、第9天脾脏指数、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、细胞免疫(细胞因子IL-1β、IL-10、IFN-γ)、孕酮、子宫和胚胎IDO、Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)及第9天和分娩时伪狂犬病特异性抗体为评价指标,旨在探讨不同色氨酸水平对雌鼠繁殖性能的影响及其可能的机制。试验选用体重为176只(34±5.5g)的雌鼠。按体重随机分成8组,每个处理7个重复,每个重复3-4只。其中4个Trp水平(0.2%、0.35%、0.5%、0.75%)为伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)攻毒组,对应的4个Trp水平(0.2%、0.35%、0.5%、0.75%)为注射PBS的对照组。雌鼠于妊娠0天腹腔注射PRV或PBS,妊娠第9天屠宰136只,余下自然分娩。试验全期自由采食,自由饮水。1.提高色氨酸水平改善孕鼠繁殖性能。0.2%攻毒组死亡率与流产率显著高于0.35%和0.5%攻毒组。0.35%、0.5%、0.75%攻毒组第九天活胚数显著高于0.2%攻毒组(P<0.05),且0.5%攻毒组活胚数最高,而PBS组活胚数差异不显著(P>0.05)。用活胚数进行回归分析,在攻毒情况下色氨酸水平为0.561%时活胚数最高。补充色氨酸提高血清孕酮水平。0.35%、0.5%攻毒组血清中孕酮水平显著高于0.2%组(P<0.05)。2.色氨酸水平影响孕鼠妊娠第9天脾脏指数及免疫相关因子的表达。提高色氨酸水平可以改善脾脏发育。0.2%和0.75%攻毒组脾脏指数显著低于0.5%水平组(P<0.05)。0.5%攻毒组脾脏指数显著高于同一色氨酸水平下PBS组。补充色氨酸可显著增加血清中9天和分娩时伪狂犬病毒特异性抗体阻断率、IgG、IgM的浓度(P<0.05),而对IgA影响差异不显著。无论是妊娠第九天还是分娩时0.5%攻毒组抗体阻断率显著高于0.2%组(P<0.05)。攻毒组随色氨酸浓度的增加升高血清IgG浓度。0.35%、0.5%攻毒组血清IgG的浓度显著高于0.2%攻毒组,而0.5%攻毒组IgG浓度又高于0.35%组。0.5%攻毒组IgM的浓度显著高于其余各组。补充色氨酸可降低胚胎组织中IL-1β、IFN-γ水平而增加IL-10水平。0.5%攻毒组胚胎IL-1β水平显著低于0.2%、0.75%色氨酸攻毒组(P<0.05)。0.2%攻毒组胚胎IFN-γ水平显著高于其余各水平攻毒组(P<0.05)。攻毒显著增加胚胎IFN-γ水平(P<0.05)。0.5%、0.35%攻毒组胚胎IL-10水平显著高于其余两组(P<0.05)。攻毒显著减低胚胎IL-10水平(P<0.05)。补充色氨酸降低妊娠9天子宫和胚胎TLR3、TLR9相对表达量,升高子宫和胚胎IDO的表达量。0.2%攻毒组子宫及胚胎IDO相对表达量显著低于其余各水平攻毒组。0.35%和0.5%攻毒组子宫及胚胎TLR3、TLR9相对表达量显著低于0.2%攻毒组(P<0.05)。攻毒组子宫和胚胎TLR3、TLR9相对表达量高于PBS组。结论:1、攻毒提高孕鼠死亡率和流产率,降低胚胎存活率和活产仔数,添加色氨酸可降低攻毒孕鼠的死亡率和流产率,提高胚胎存活率和活产仔数。其机制在于添加色氨酸调节病毒感染孕鼠子宫内环境Th1/Th2的比例,并下调TLR基因的表达。2、攻毒提高孕鼠的色氨酸需要量,保证感染PRV孕鼠第9d活胚胎数最高时,色氨酸的需要量为正常孕鼠的1.6倍。
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