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目的:观察亚低温对脑缺血再灌注青年雄性C56BL6小鼠海马蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK),真核翻译起始因子2α(Eukaryotic translation initiation factor 2α,e If2α)和激活转录因子4(Activing transcription factor 4,ATF4)通路表达,神经行为功能评分以及小鼠海马神经元凋亡的影响,探讨亚低温通过抑制内质网应激减少细胞凋亡,发挥脑保护作用的内在机制,为临床治疗脑缺血疾病提供一定的依据。方法:8-12周龄健康雄性C56BL6小鼠144只,体重20-30g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=48):假手术组(S组)、脑缺血再灌注手术组(I/R组)、全身亚低温手术组(H组)。采用双侧颈总动脉阻断法(BACCO)建立小鼠前脑缺血再灌注模型,脑缺血15 min后再灌注(I/R组)。S组只将双侧颈总动脉与迷走神经分离但不夹闭作为实验对照组。H组于缺血再灌注即刻向小鼠全身喷洒酒精进行体表降温,术中维持小鼠直肠温32~34℃3 h。分别于再灌注6、12、24、72h时,对所有小鼠进行神经行为学评分,并采用Western blot法测定海马p-PERK、p-e If2a和ATF4的表达;HE染色法计数海马存活神经元数目,TUNEL法测定凋亡神经元数目。结果:与S组相比,I/R组和H组再灌注各时点神经行为学评分明显升高,差距具有统计学意义(P<0.05)。S组海马CA1区神经元形态大致正常,脑组织结构清晰完整,细胞核居中,呈圆形或椭圆形,神经元胞浆丰富,着色为浅紫色。I/R组和H组各灌注时间点海马区存活神经元计数明显减少,细胞外形皱缩,核固缩,核染色质深染增多。大片神经元细胞消失、稀疏、排列紊乱。胞核固缩或溶解碎裂,着色为深紫色。S组几乎看不到凋亡细胞,且各时间点之间差异无统计学意义(P>0.05)。与S组相比,IR组与H组海马CA1区再灌注各时间点,贴壁细胞出现皱缩、变形、脱落;而染色细胞呈现染色质浓缩、边缘化,核膜裂解,染色质分割成块状/凋亡小体。TUNEL染色阳性神经元均明显增加(P<0.05),S组小鼠三个蛋白几乎没有或者少量表达,且在再灌注各时间点S组表达相对值的差异没有统计学意义(P>0.05),I/R组和S组海马区p-PERK、p-e If2α和ATF4蛋白表达量升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与I/R组相比,H组再灌注各时间点神经行为学评分降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。第12h、24h和72 h时海马存活神经元计数增加,神经元细胞消失、稀疏、排列紊乱。胞核固缩或溶解碎裂减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。6h、12h、24h和72h凋亡神经元计数减少,再灌注各时点p-PERK、p-e If2α和ATF4表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1、亚低温可以改善脑缺血再灌注后小鼠神经功能缺损。2、亚低温通过抑制小鼠脑缺血再灌注后内质网应激通路p-PERK、p-e If2a和ATF4的表达,从而减轻脑缺血/再灌注损伤时的内质网应激反应,抑制神经细胞凋亡,从而发挥脑保护作用。