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速激肽是一类结构保守的肽家族,通过与其受体相结合,参与包括免疫调节、炎症反应、呼吸道和胃肠道肌肉收缩和肿瘤进程等各种生理或病理活动。目前在哺乳动物中发现的速激肽主要有substance P、 neurokinin A和neurokinin B。速激肽的受体为神经激肽受体,是目前国际上研究很热的常规药靶受体—G蛋白偶联受体家族的成员。目前发现的神经激肽受体包括神经激肽1受体、神经激肽2受体和神经激肽3受体。鉴于神经激肽受体广泛参与各种生理活动,在过去的许多年中,一大批高选择性的神经激肽受体拮抗剂被合成出来,并且许多实验证明这些拮抗剂能够有效治疗许多疾病。目前,神经激肽受体的拮抗剂已经从第一第二代具有较大副作用且易降解的肽类拮抗剂发展到第三代具有高亲和性和高选择性的非肽类的小分子化合物。其中的代表是SR140333(神经激肽1受体拮抗剂),SR48968(神经激肽2受体拮抗剂),这两种拮抗剂已经进入临床二期治疗哮喘的研究。目前研究发现速激肽及其受体与肿瘤发生密切相关。在一些肿瘤中,神经激肽1受体的表达发生明显上调,神经激肽1受体的数量往往代表肿瘤的恶性程度：SP及其受体NK1R参与到许多肿瘤病理进程中：如促有丝分裂、血管发生、细胞迁移和细胞转移；NKA是结肠、回肠和中肠神经内分泌瘤的一个重要的预后指标。许多研究表明一些NK1R拮抗剂具有良好的抗肿瘤效果,如Aprepitant,L-733,060,L-732,138和MEN11467,尤其是Aprepitant有可能是一个广谱的抗肿瘤药物。而仅有几篇文献报道SR140333在乳腺癌和结肠癌中的作用,还未发现文献报道SR140333对白血病生长的作用,也未发现关于SR48968对各种肿瘤作用的报道。更未见相关研究来阐明神经激肽受体拮抗剂抗肿瘤的机制。在本研究中,以慢性髓系白血病K562细胞为实验对象,研究SR140333和SR48968抑制K562细胞增殖的机制。通过MTT实验和光学显微镜观察发现SR140333和SR48968对K562细胞具有剂量和时间依赖的抑制作用。Hoechst33342和流式细胞术实验表明拮抗剂是通过诱导细胞凋亡从而抑制细胞的增殖。Western blot实验结果显示：SR48968和SR140333处理K562细胞后,细胞增殖蛋白c-Myc明显下调,与凋亡相关的蛋白Bc1-2和Bax的表达明显上调,与细胞周期相关的蛋白CDK4的表达明显下调；而神经激肽1受体(NK1R)和神经激肽2受体(NK2R)的蛋白表达水平不受拮抗剂处理的影响,表明SR140333和SR48968是通过阻断神经激肽受体,从而引起细胞内一系列的生化反应来起到阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡的效果。同时,本研究利用蛋白组学技术检测拮抗剂作用K562细胞前后产生的差异蛋白,最终SR140333作用K562前后产生50个差异蛋白,SR48968作用K562前后产生71个差异蛋白,这些差异蛋白为进一步阐明拮抗剂抑制K562细胞增殖的机奠定了基础。另外,现在我们利用皮下注射K562细胞构建了裸鼠白血病模型,拮抗剂在动物水平的抗肿瘤效果正在展开。综上所述,SR140333和SR48968能够剂量和时间依赖地抑制慢性髓系白血病K562细胞的增殖,拮抗剂的抗肿瘤机制可能是通过阻断神经激肽受体,从而通过引起细胞凋亡和周期阻滞等途径抑制K562细胞增殖。