自交联透明质酸凝胶对胃癌和肝癌细胞转移和增殖抑制作用的研究

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研究目的在体外细胞水平,阐明自交联透明质酸凝胶(Cross-linked hyaluronic acid gel,CHAG)对胃癌和肝癌细胞的增殖、迁移、侵袭等生物学活动的影响及其机制。在动物活体水平,进一步阐明自交联透明质酸凝胶对胃癌和肝癌细胞定植、生长和转移的影响,进而明确CHAG是否可以用于防止腹部肿瘤切除术后的肠道粘连。研究方法以胃癌细胞株AGS和肝癌细胞株Hep G2作为研究对象;采用Transwell实验和MTT实验在体外水平研究CHAG对细胞迁移、侵袭及增殖活动的的影响;采用腹腔移植瘤裸鼠模型实验,观察CHAG对肿瘤细胞定植、生长和转移的影响;采用Western Blotting、Pull-down assay和si RNA干扰等方法探讨CHAG对肿瘤细胞上述生物学活动的作用机制。研究结果Transwell实验结果表明,CHAG抑制表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导的胃癌和肝癌细胞的迁移和侵袭活动。MTT实验结果表明,CHAG抑制EGF诱导的胃癌和肝癌细胞的增殖活动。腹腔移植瘤裸鼠模型实验结果表明,CHAG抑制胃癌和肝癌细胞在腹腔的定植和增殖。Pull-down assay结果表明,CHAG抑制溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)诱导的Rho A激活和EGF诱导的Rac1激活。Western Blotting实验结果表明,CHAG通过抑制表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的激活,阻断EGF/EGFR诱导的MAPK/ERK和PI3K/Akt通路的信号转导,减少EGF诱导的MMP2和PCNA的表达。此外,CHAG对包括整合素(Integrin)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在内的其它细胞膜受体的激活也有抑制作用。si RNA实验的结果表明,当透明质酸受体(CD44或RHAMM)的表达被干扰时,CHAG的上述抑制的作用仍然存在,表明CHAG并非通过与HA受体结合而发挥其抑制作用,提示CHGA可能通过物理性黏附而阻断生长因子与其受体的结合,进而发挥抑癌作用。结论CHAG可以抑制胃癌和肝癌细胞的生长和转移,该作用可能是通过CHAG物理性地覆盖在细胞表面,阻断配体与受体的结合而实现的。
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