病毒对人体细胞的感染主要体现为持续性的大量复制,病毒复制受控于其基因组。因此,控制病毒基因组的复制在病毒感染治疗领域尤为重要。核酸类药物做为病毒病治疗的重要药物之一,其主要作用机制是控制病毒核酸的复制,从而降低感染水平,使机体恢复抵抗力和正常功能。核酸类药物研究的一个重要方面即是评估各种修饰后的核苷分子对不同聚合酶的作用效果,因此需要建立相应的检测方法。本项研究主要采用荧光定量PCR技术检测了体外DNA聚合酶和反转录酶对合成的L/D型的双脱氧鸟苷酸识别和掺入情况,筛选具有较好抗病毒活性的先导化合物或核酸类药物,为进一步考察其在生物体内的状况提供临床前基础数据,同时建立异核苷酸掺入检测的方法。实验表明,L/D型双向脱氧鸟苷三磷酸能够被DNA聚合酶识别,并且随着掺入比例的增加,达到了抑制其扩增的效果。其中L型掺入范围为0.8mmol/L~1.6mmol/L,并随着掺入量的增加,扩增效率逐渐降低,当掺入浓度超过1.6mmol/L时,DNA扩增完全被抑制;D型掺入范围为1.6mmol/L~3.2mmol/L,随着掺入量的增加,扩增效率逐步降低,当掺入浓度超过3.2mmol/L时,扩增完全被抑制。以病毒DNA聚合酶和HIV逆转录酶为靶点,针对L/D型双脱氧鸟苷酸开展酶识别研究,有望发现新结构类型抗HIV和抗HBV感染的药物,并阐明作用机制,对控制和治愈病毒性传染疾病的发生具有深远的意义。