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牙周炎是牙菌斑中的微生物所引起的牙周支持组织的慢性感染性疾病,并导致牙周支持组织的破坏。由牙周致病菌激发的牙周局部固有免疫应答所导致的牙槽骨吸收,是牙周疾病的主要临床症状,也是我国成人失牙的最主要病因。牙周组织的再生和重建一直是牙周炎治疗的重点和难点。近年研究发现miR-34a参与骨稳态调节,可在体内和体外刺激骨形成,可用于牙周炎的基因治疗,然而其细胞摄取效率有限。N-乙酰-L-亮氨酸-聚乙烯亚胺(N-acetyl-L-Leucine-polyethylenimine,N-Ac-L-Leu-PEI)是树枝状聚合物聚乙烯亚胺(PEI)的衍生物,具有良好的生物相容性和转染效率,可用于mi R-34a的载体。前期试验中,N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a复合物成功转染至人骨肉瘤细胞MG63中,并促进MG63细胞成骨分化。本实验将N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a复合物用于大鼠颅骨缺损模型,探讨miR-34a对骨缺损区成骨的影响。方法:制备载有10μL磷酸盐缓冲液(PBS)、8μgN-Ac-L-Leu-PEI、含有2μg mi R-34a的N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a复合物及含有2μg NC的N-Ac-L-Leu-PEI/NC复合物的口腔生物膜,冻干备用;Wistar雄性大鼠32只,随机分为四组,全麻及无菌条件下于左侧颅骨制备直径0.5cm全层骨缺损,于缺损处置各组口腔生物膜,培养10周后处死大鼠,通过CBCT、micro-CT、硬组织切片HE染色等方法检测大鼠颅骨缺损处成骨情况,RT-PCR检测大鼠颅骨缺损区域特异性成骨相关因子Runx2、SP7及COLⅠmRNA表达水平。结果:1.N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a复合物组缺损处明显可见新骨形成,而其他各组未见明显骨形成;2.N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a复合物组BV/TV值、Tb.Th值较其他组明显上升,其差异具有统计学意义(p<0.05),提示缺损区域有新骨形成,且骨小梁厚度增加;3.N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a组见更多类骨质、成骨细胞及新生骨质。4.N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a复合物上调了特异性成骨相关因子Runx2、SP7及COLⅠmRNA表达水平,其差异具有统计学意义(p<0.05),说明N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a复合物促进缺损区域成骨向分化。结论:对实验性大鼠颅骨缺损模型,N-Ac-L-Leu-PEI/miR-34a具有促进缺损区成骨的作用。