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目的：观察银杏叶提取物(Extract ginkgo biloba，EGb)对D-半乳糖(D-Galactose，D-Gal)致痴呆模型大鼠空间学习记忆能力及海马CA1区神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase，nNOS)活性，天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9(Caspase-9P35)蛋白表达的影响，探讨EGb改善认知能力的机制，为EGb临床防治痴呆提供实验和理论依据。
方法：采用D-Gal腹腔注射制作痴呆大鼠模型。将Y型迷宫筛选的反应迅速、活跃的48只Spraque-Dawley(SD)大鼠随机分为6组(n=8)：即对照组(Control，Con)、半乳糖组(D-Gal)、银杏叶低剂量组(EGb-L)、银杏叶中剂量组(EGb-M)、银杏叶高剂量组(EGb-H)及治疗组(Treating，Tre)，其中银杏叶三个剂量组作为预防组。各组大鼠实验前及第8、10周均用Y型迷宫测定行为学变化，定量反应其学习记忆能力；焦油紫染色(Cresyl violet staining)观察海马CA1区细胞形态学变化；TUNEL法检测海马CA1区神经元凋亡；免疫组织化学染色方法和WesternBlot免疫印迹法检测海马CA1区nNOS活性、Caspase-9P35蛋白表达。
结果：
(1)Y型迷宫检测显示：与对照组相比，半乳糖组学习尝试次数明显增加，记忆正确次数明显减少，差异均有统计学意义(P<0.01)。与半乳糖组相比，EGb各剂量组学习尝试次数不同程度减少，记忆正确次数不同程度增加，其中EGb中、高剂量组差异有统计学意义(P<0.01)，EGb低剂量组变化无统计学意义(P>0.05)。与治疗前相比，治疗组在治疗2周后学习尝试次数减少，差异有统计学意义(P<0.05)，记忆正确次数增加，差异有统计学意义(P<0.01)。
(2)焦油紫染色显示：半乳糖组海马CA1区神经元核固缩深染，胞体皱缩，损伤严重，排列紊乱。与半乳糖组相比，EGb各剂量组及治疗组海马CA1区损伤不同程度减轻。EGb高、中、低剂量组及治疗组神经元存活数相对对照组分别为78.3％、39.7％、16.7％、13.3％，与半乳糖组相比，EGb高、中剂量组差异均有统计学意义(P<0.01)，EGb低剂量组差异有统计学意义(P<0.05)，治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。
(3)TUNEL法检测显示：对照组海马CAl区可见很少的TUNEL阳性神经元。半乳糖组可见较多的TUNEL阳性神经元，与对照组相比，差异有统计学意义(P<0.01)。与半乳糖组相比，EGb各剂量组、治疗组TUNEL阳性神经元不同程度减少， EGb中、高剂量组差异均有统计学意义(P<0.01)，EGb低剂量组、治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。
(4)nNOS及Caspase-9P35免疫组织化学染色显示：对照组海马CA1区可见较少的nNOS、Caspase-9P35阳性神经元。半乳糖组海马CAl区可见较多nNOS、Caspase-9P35阳性神经元，与对照组相比，差异有统计学意义(P<0.01)。与半乳糖组相比，EGb各剂量组nNOS、Caspase-9P35阳性表达不同程度降低，EGb低剂量组差异有统计学意义(P<0.05)，EGb中、高剂量组差异均有统计学意义(P<0.01)。治疗组nNOS阳性表达较半乳糖组有所降低，差异有统计学意义(P<0.05)，治疗组Caspase-9P35阳性表达较半乳糖组有所降低，但差异无统计学意义(P>0.05)。
(5)nNOS及Caspase-9P35的Western Blot免疫印迹显示：与对照组相比，半乳糖组海马CAl区nNOS活性增高，Caspase-9P35蛋白表达增加，差异均有统计学意义(P<0.01)。与半乳糖组相比，EGb中、高剂量组海马CAl区nNOS活性、Caspase-9P35蛋白表达不同程度降低，差异均有统计学意义(P<0.01)。EGb低剂量组、治疗组nNOS活性较半乳糖组有所降低，差异有统计学意义(P<0.05)，EGb低剂量组、治疗组Caspase-9P35蛋白表达较半乳糖组有所降低，但差异无统计学意义(P>0.05)。
结论：
1、D-Gal腹腔注射致痴呆大鼠海马CA1区出现神经元凋亡，Caspase-9P35激活参与这一过程。
2、D-Gal致痴呆大鼠海马CA1区nNOS活性增加，Caspase-9P35表达增加。
3、EGb能降低D-Gal致痴呆大鼠海马CA1区nNOS活性，减弱Caspase-9P35激活，抑制海马CA1区神经元凋亡，从而改善痴呆大鼠的学习记忆障碍，且随剂量增加作用增强。
4、EGb预防痴呆的作用优于其治疗作用。