流苏树组织培养技术的研究

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流苏树(Chionanthus retusus Lindl.et Paxt),又名萝卜丝花、茶叶树、四月雪等,木犀科(Oleaceae)流苏树属(Chionanthus)落叶乔木,国家二级保护植物,主要分布于我国甘肃、陕西、山西、河北、河南以南至云南、四川、广东、福建、台湾等。流苏树的花含有多种黄酮、三萜类化合物,可代茶叶,并具有一定的药用价值;其材质较好,可制器具和供细木工用;果实含油率高,是一种重要的能源植物。流苏树枝叶繁茂,花大而美丽,是优良的造林和观赏树种。流苏树传统繁育方式繁殖周期长、系数低,但是目前对流苏树的组织培养从未见报道,因此建立流苏树快速繁殖体系,缩短流苏树繁殖周期,为生产上提供大量优良苗木奠定理论及实践依据。本试验以流苏树种胚为外植体,探讨流苏树种胚最适消毒条件、最适培养基及激素配比等,获得完整植株。其次以无菌苗带顶、侧芽茎切段为材料,通过不同的激素配比,获得完整的流苏树再生植株,并确定其再生体系的最适条件。第三以流苏树子叶为材料,诱导流苏树愈伤组织,测定其在不同浓度NaCl胁迫下(0、50、100、150、200mmol·L1)的可溶性糖、可溶性蛋白、脯氨酸、丙二醛(MDA)含量和SOD、POD活性,结果显示:1.流苏树种胚最佳消毒条件为:0.1%升汞消毒2min,成活率达94.2%;2.流苏树种胚萌发生根最佳培养基为:WPM+0.1mg·L1NAA+3.0mg·L1GA3+1.0mg·L16-BA;3.流苏树种胚萌发生芽培养基为:WPM+1.0mg·L1GA3+1.5mg·L16-BA;4.流苏树带顶、侧芽茎切段增殖培养最适培养基为: WPM+1.0mg·L1GA3+1.0mg·L16-BA+0.5mg·L1TDZ;5.流苏树带顶、侧芽茎切段生根培养最适培养基为:WPM+0.1mg·L16-BA+0.5mg·L1NAA+0.5mg·L1IBA;6.流苏树子叶诱导愈伤组织最适培养基为: WPM+0.5mg·L1NAA+0.5mg·L12,4-D+0.1mg·L16-BA;7.在不同浓度NaCl胁迫下(0、50、100、150、200mmol·L1)的流苏树愈伤组织,其可溶性糖、可溶性蛋白、游离脯氨酸、MDA含量和SOD、POD活性变化如下:可溶性糖和脯氨酸的含量表现为先下降后上升,其中50mmol·L1NaCl处理组的流苏树愈伤组织中均低于未处理组;其他指标中,可溶性蛋白的含量整体显示先升高再下降;MDA含量初期迅速升高,中后期缓慢下降,对照组持续下降;SOD活性表现为迅速升高后稍有下降;POD活性初期下降明显,中后期显著上升,对照组变化较处理组不明显。
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