第一部分：脓毒症大鼠血小板活化的研究 物p一血农毒症大鼠血小板计数和血小板活化标记物p一血小板球蛋白(p-TG)、血小板主状态F4)血清浓度，探讨脓毒症大鼠血小板活性状态的变化及其意义。L穿孑时象分为假手术术后6h、24h组和盲肠结扎穿孔(CLP)术后6h、24h组，手术丑盲肠结扎穿孔法制作脓毒症大鼠模型，假手术组不行盲肠结扎穿孔。大鼠趸4，j留取血液标本行血气、肝肾功能等常规检测，并检测血小板计数及采用酶缸小付(ELISA)方法检测血清B一血小板球蛋白、血小板第4因子浓度；并留取肺. 术后6h及24h组，假手术组与CLP组之间的差异均具有统计学意义(P＜0.01)。气，肝。肾功能及肺肝肾病理结果表明本研究中的CLP模型较好地模拟了脓辜症大鼠血小板计数较正常大鼠下降，尤其在CLP术后24h组下降更为明走大鼠血小板活化标志物p-’FG和PF4浓度较正常大鼠升高，尤其在CLP且升高更为明显；提示脓毒症大鼠存在血小板活化现象，且脓毒症病情越重七程度越明显。 第二部分：脓毒症大鼠血小板蛋白质组学的研究 [目的] 观察脓毒症大鼠血小板蛋白质组的变化，从血小板整体蛋白质水平探讨脓毒症的病理生理机制，为临床诊治脓毒症提供理论依据。 [方法] 实验分2组：假手术组及CLP术后24h组，每组6只大鼠。然后分别于手术后24h经颈动脉插管取血。分离血小板，应用蛋白质组学技术提取血小板总蛋白，利用固相pH梯度及SDS-PAGE二维凝胶电泳分离血小板总蛋白，考马斯亮蓝染色、imagescanner扫描、PDQuest软件图像分析找出差异表达蛋白质点，应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析(MALDI-TOF-MS)及Mascot查询软件、NCBI、MSDB数据库鉴定差异表达蛋白。对质谱鉴定出的差异表达蛋白质FGG进行免疫印迹(Western blot)方法分析，验证FGG在两组大鼠血小板中的表达情况。 [结果] 1每组6张胶上表达的蛋白质点数分别为2094±355，1769±229个；平均匹配率分别为93％、91％；等电聚焦(IEF)方向位置偏差分别为(0.79±0.24)mm．、(0.71±0.40)mm；SDS-PAGE方向位置偏差分别为(1.0±0.31)mm、(1.1±0.42)mm。 2筛选出差异表达蛋白质点20个，进行质谱分析质谱峰信噪比均高，经查询蛋白质序列数据库鉴定了7个蛋白质点，对应8种蛋白质，分别为肌球蛋白轻链、琥珀酸脱氢酶复合体亚基B、ATP合酶β亚基、丝氨酸蛋白酶抑制剂、纤维蛋白原γ链、α1-抗胰蛋白酶前体、蛋白质二硫化物异构酶A3。 3图像分析发现在鉴定出的蛋白质中，对照组与脓毒症组比较除蛋白质二硫化物异构酶A3和肌球蛋白轻链表达下调外，其余几种蛋白均上调。 4 Western blot方法验证脓毒症后血小板FGG的表达结果显示，CLP术后血小板FGG表达升高，与2-DE结果一致。 [结论] 1本研究建立了图像清晰、分辨率高、重复性好的脓毒症大鼠血小板蛋白质固相pH梯度2-DE图谱，为脓毒症血小板2-DE图谱数据库的建立提供了数据资料。 2脓毒症组和假手术组大鼠血小板蛋白质表达具有差异，这些蛋白质的差异表达可能使血小板枯刚、聚集、释放、促凝等功能活动异常，导致血小板活化，并促发SIRS和脓毒症，对早期诊断脓毒症可能具有分子标记意义，为脓毒症发病机制的探讨提供了新线索。