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背景近年来,随着高血压患病率的逐年上升,高血压肾损害的人群也在逐渐增多,高血压肾损害是终末期肾脏病(ESRD)常见病因之一,对于其早期预防和治疗能够有效减少ESRD的发生。早期高血压肾损害以肾小管损害为主,晚期可累及肾小球,使其发生缺血性硬化,影响肾脏血流灌注,降低肾小球滤过率。所以早期干预治疗,是延缓高血压肾损害患者肾功能恶化的重点。文献报道表明,下瘀血汤可以从多个角度发挥肾脏保护作用,但鲜有其对肾小管保护作用研究的报道。高血压肾损害早期具有夜尿增多,尿渗透压下降、尿微量白蛋白尿和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG酶)升高等表现,水通道蛋白2(AQP2)对维持正常水液代谢至关重要。我们的前期工作证明下瘀血汤有减少高血压肾损害患者夜尿次数,降低尿NAG酶、24小时尿微量白蛋白的作用,本研究拟通过动物实验来验证下瘀血汤对自发性高血压肾损害大鼠的肾脏保护作用,探究其可能的肾脏保护机制,为临床治疗高血压肾损害提供新的中医药治疗方法。目的通过下瘀血汤对自发性高血压肾损害大鼠的干预治疗,观察大鼠血压、肾功能、尿NAG酶、尿AQP2、肾脏AQP2表达及肾脏病理的变化状况,探究其可能的肾脏保护机制,为临床治疗高血压肾损害探索新的治疗方案。方法采用随机对照的分组方法,将14周龄雄性Wistay-Kyoto大鼠(WKY)和自发性高血压大鼠(SHR)作为研究对象,适应性喂养一周,在15周龄时,随机分为6组,每组8只,分别为正常组(给予生理盐水)、模型组(给予生理盐水)、中药组(给予下瘀血汤方)、西药组(给予贝那普利方)、低剂量组(给予西药+低剂量中药)、高剂量组(给予西药+高剂量中药)。大鼠每4只1笼,恒温恒湿,标准鼠食喂养,总计给药8周。实验过程中观察记录大鼠一般情况、测定血压(分别于给药前0周、给药后第4周、第8周测定),肾功能、尿NAG酶、尿AQP2(分别于给药前后测定),治疗8周后留取各组肾脏组织,石蜡切片进行HE染色观察肾组织病理变化,免疫组化观察肾脏AQP2表达情况。采血方法:给药0周采用眼眶取血,给药8周大鼠麻醉、腹主动脉取血。所有数据采用SPSS20.0统计学软件进行分析处理。结果1、大鼠的一般状况与正常组大鼠相比较,给药前自发性高血压大鼠活动性强,善于打斗,喜安静,易受惊吓,环境适应能力差,声音刺激敏感性强;给药后中药组、西药组、高剂量组及低剂量组大鼠一般状态良好,毛泽光滑,喜睡,饮食如常,给药配合,逐渐适应饲养环境。2、大鼠血压与模型组相比较,给药第8周西药组、低剂量组血压较前下降明显,有显著统计学意义(P<0.01),高剂量组血压较前下降,有统计学意义(P<0.05),中药组血压较模型组降低,没有统计学意义(P>0.05),其中低剂量组降压幅度优于西药组,没有统计学意义(P>0.05)。3、大鼠肾功能(血肌酐、尿素氮、血尿酸)血肌酐方面,给药第8周中药组、西药组、高剂量组、低剂量组血肌酐较治疗前均下降,但与模型组相比较没有统计学意义(P>0.05);尿素氮方面,与模型组相比较,给药第8周高剂量组和低剂量组显著降低,有明显统计学意义(P<0.01),其中高剂量组降低幅度优于低剂量组,中药组和西药组尿素氮水平较前有下降趋势,但没有统计学意义(P>0.05);血尿酸方面,给药第8周中药组、西药组血尿酸较治疗前均有下降,与模型组比较没有统计学意义(P>0.05)。4、大鼠尿液分析(尿NAG酶、尿AQP2)尿NAG酶方面,与模型组相比较,给药第8周中药组、西药组、高剂量组、低剂量组各组尿NAG酶变化不明显,没有统计学意义(P>0.05);尿AQP2方面,与模型组比较,中药组、西药组、高剂量组及低剂量组尿AQP2较前变化不明显,没有统计学意义(P>0.05)。5、大鼠肾脏病理分析与正常组比较,模型组部分大鼠肾小球系膜基质增多,肾小球囊腔狭窄,肾近曲小管管腔狭窄,部分肾小动脉硬化,有显著性差异。与模型组比较,西药组:肾小管上皮细胞未见明显浊肿,较模型明显减轻,个别大鼠肾小球局灶节段性硬化,其余大鼠肾脏未见明显病变,有统计学差异;低剂量组:肾小管病变较模型组明显减轻,肾小球病变、肾小动脉病变较模型组未见明显差异;高剂量组:肾小管均未见明显病变,个别大鼠肾小球节段性硬化,纤维组织增生,其余大鼠肾脏未见明显病变,较模型组明显减轻,有统计学差异;中药组:个别大鼠肾小管上皮细胞轻度浊肿,部分肾小球节段性硬化,肾小球萎缩,较模型组有所减轻,但未见统计学差异。6、大鼠肾组织AQP2免疫组化结果AQP2阳性着色位于肾脏集合管主细胞胞膜和胞质,模型组的肾脏AQP2表达水平明显高于正常组;与模型组比较,低、高剂量组和中药组的肾脏AQP2表达水平明显减低,西药组的肾脏AQP2表达水平有所减低,但未见统计学差异。结论1、下瘀血汤可以改善高血压肾损害大鼠的一般状态;2、下瘀血汤可以降低高血压肾损害大鼠的血压;3、下瘀血汤可以降低高血压肾损害大鼠血肌酐、血尿酸及尿素氮的水平;4、下瘀血汤可以减轻高血压肾损害大鼠的肾脏病理损伤;5、下瘀血汤可以降低高血压肾损害大鼠肾组织AQP2的表达来保护肾脏。