金-银等离子体卫星结构的组装及其应用

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贵金属纳米颗粒的局域表面等离子体共振(LSPR)现象使其具有优异的光学和物理性质,这些性质使它们能够应用作为灵敏的传感器或功能性纳米探针,并可用于高效催化剂研究。特别地,通过调控不同的金属纳米颗粒合成方法、采用多样金属纳米颗粒表面功能化技术以及不同的纳米颗粒的自组装技术,制备得到设计合理、性能优异具有靶向特异性的无标记等离子体生物传感器,从而实现在单个纳米颗粒水平的实时、快速、高灵敏度、低检测限的生物检测。因此,本文制备了一种基于金纳米球和银纳米球组装体的生物传感器,建立了在单纳米颗粒水平高灵敏检测端粒酶活性的方法。主要内容如下:1、构建基于金纳米球和银纳米球组装的卫星结构生物传感器。第一步,采用柠檬酸钠还原法制备晶种,然后利用盐酸羟胺还原生长法合成大尺寸金纳米球作为卫星结构核心,并固定于ITO玻璃表面,接着利用金-硫键在金纳米球表面修饰探针DNA分子;第二步,采用柠檬酸钠-单宁酸双体系还原法制备银纳米球,然后利用胞嘧啶对银纳米球的吸附作用,通过调节pH的方法在银纳米颗粒表面修饰与金纳米球表面探针DNA部分碱基互补配对的DNA分子;最后,利用DNA碱基互补配对作用将表面修饰好的银纳米球与金纳米球进行卫星结构组装,组装后的探针DNA形成发夹结构。通过暗场显微镜和单颗粒的局域表面等离子体共振散射光谱进行表征和分析,结果表明较好的完成金纳米球与银纳米球的卫星结构组装。2、利用金纳米球和银纳米球的原位组装体实现对端粒酶活性的检测。利用单颗粒的局域表面等离子体共振散射光谱进行端粒酶活性的检测分析。活性端粒酶能够在脱氧核糖核苷三磷酸存在的情况下使端粒延长引物链末端增加(TTAGGG)重复序列,所延长的重复序列片段能够与金纳米球和银纳米球的组装体形成的发夹DNA部分进行碱基互补配对,从而取代下金纳米球表面组装的银纳米球颗粒,引起单颗粒颜色的变化,同时其对应的单颗粒局域表面等离子体共振散射光谱发生红移,所引起的红移量与端粒酶的活性呈线性关系。至此能够在单颗粒水平实现端粒酶活性的检测,同时可由单颗粒颜色的明显变化实现肉眼可见的端粒酶活性检测。3、利用金纳米球和银纳米球的溶液态组装制备表面拉曼增强生物探针。首先分别制备50nm金纳米球和20 nm银纳米球溶液;接着在金纳米球表面修饰探针DNA和拉曼分子4-MBA,在银纳米颗粒表面修饰与探针分子碱基互补配对的DNA链;最后调控两种纳米颗粒的组装浓度比例,利用碱基互补配对得到较好的溶液态卫星结构拉曼生物探针。利用TEM和拉曼图谱表征,结果表明能够较好的制备金银纳米球的卫星组装结构拉曼生物探针。
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