苹果隐花色素基因MdCRY1和MdCRY2的克隆及功能鉴定

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:weifeng151
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
隐花色素是一类光受体,它们能够特异地感受环境中的蓝光信号,调节植物的生长发育。该类基因广泛的存在于动植物体内,其功能已经在模式植物中被鉴定。光在果树的形态建成中具有重要作用,但还未见果树光受体的相关研究。本研究从苹果中克隆到2个隐花色素基因MdCRY1和MdCRY2,并对其基因结构特点,表达特异性及其在植物体内的功能等进行了分析和鉴定。主要研究工作与结果如下:1.利用RACE的方法,克隆得到2个苹果隐花色素基因MdCRY1和MdCRY2,并通过序列分析发现它们在蛋白结构上具有该类蛋白保守的N端的光裂合酶相关功能域、FAD结合结构域和C端的DQXVP-acidic-STAES (DAS)结构域:(1)MdCRY1全长cDNA,总长度为2310bp,其中ORF区为2040bp,编码一条含680个氨基酸的多肽,预测的PI为5.3,分子量为76.6kDa。(2)MdCRY2全长cDNA,总长度为2102bp,其中ORF区为1944bp,编码一条含648个氨基酸的多肽,预测的PI为5.7,分子量为73.5kDa。2.半定量RT-PCR分析表明,两个基因在苹果的各个组织和器官中组成型表达;用光处理“红星”果实和“王林”愈伤,发现这两个基因的表达明显受到光信号诱导,说明MdCRY1和MdCRY2基因参与苹果的光响应。3.功能互补试验结果表明,MdCRY1和MdCRY2分别能够部分恢复拟南芥cry1及cry2突变体在光形态建成中的发育缺陷,并且在野生型拟南芥中过量表达MdCRY1和MdCRY2,能够进一步表现出光形态建成加强的表型,说明MdCRY1和MdCRY2都参与植物的光形态建成。另外,这两个基因都表现出了明显的促进花青素积累的功能,说明它们在促进苹果果实着色方面有重要作用。4.酵母双杂交及双分子荧光互补实验表明,MdCRY1及MdCRY2能够和拟南芥的AtCOP1蛋白进行互作,为进一步研究苹果中光信号转导的分子机制指明了方向。
其他文献
目前,网络已成为整个社会人们的生活和生产的主要载体,以其内在独有的吸引力和创新发展能力影响着社会生活.高校理想信念教育应积极参与并正确认识网络影响力,充分利用网络资
以人口结构和家庭结构的变迁、经济和财政形势恶化以及原有制度的步履维艰为建制背景的日本护理保险制度是以用更少的资金为更多的老人提供更好的护理保障为制度目标的。围绕
习近平在十九大报告中指出中国特色社会主义进入了新时代,最本质的特征就是中国共产党领导,中国特色社会主义制度的最大优势是中国共产党领导。高校作为培养社会人才的地方,
文化自信是民族自信的前提和基础,是实现中国梦的基石。当今社会快速发展,文化背景也呈现出了多元化趋势。如何保证高职学生在多元文化背景下的文化自信极为重要。本文主要阐