铜绿假单胞菌是一种常见的机会致病菌,是医院内感染的主要病原菌之一。由于其自身固有的耐药性和获得耐药性,导致该菌引起的感染很难治疗。目前对于该菌的致病性研究多数集中在单个菌株,而感染的实际情况更加复杂,存在多种微生物。每一种微生物都能进行种间或种内的信号传递。通过这种信号传递,不同菌株之间会产生一种相互作用,在感染过程中绝大多数相互作用都会对宿主产生不利影响,加大治疗的难度。因此,研究多种致病菌之间的作用机制对于研发新的治疗药物及治疗策略具有重要意义。实验前期,将铜绿假单胞菌PAO1和实验室保存的100株临床菌分别进行共培养筛选,发现一株临床菌,在共培养情况下能够促进PAO1绿脓菌素的产生,将其命名为E9。为了找出E9作用于PAO1中的基因,构建了转座突变体库,最终筛选出17株目的菌株。共培养时,E9不能促进其绿脓菌素产生,但纯培养时绿脓菌素产量与野生型相似或更高。最后进行测序。根据筛选的结果,选择表型最为明显的PA2228基因,将其进行缺失突变,得到突变体PAO1(?PA2228)。然后,将其与E9进行共培养。结果显示:在E9和PAO1(?PA2228)共培养时绿脓菌素产量与PAO1(?PA2228)纯培养时一致。为了排除E9和PAO1(?PA2228)共培养时,绿脓菌素不增加是由于PAO1(?PA2228)生长劣势的可能性,分别对野生型与突变体的共培养体系中两种菌的比例进行监测。发现两种共培养体系中菌数比例相似。表明在临床菌E9和铜绿假单胞菌共培养时作用于PA2228基因,导致绿脓菌素产量增加。临床菌E9能够通过PA2228基因促进PAO1绿脓菌素的产生,但E9是否也能通过PA2228基因改变PAO1中其它毒性因子的变化?于是本实验对PAO1(?PA2228)的毒性因子进行检测,发现PAO1(?PA2228)中毒性因子的产生减少,如生物被膜、胞外多糖、胞外蛋白酶、运动能力以及Ⅲ型分泌蛋白产量都下降。由此推测,临床菌E9与铜绿假单胞菌PAO1共培养不仅能促进绿脓菌素的产生,也能引起其它毒力因子的变化。