纳米材料介孔硅携带阿霉素在胶质瘤靶向治疗中的应用研究

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目的探讨纳米材料介孔硅(MSN)包裹聚乙二醇(PEG)并连接白介素-13多肽(IP)后制成的靶向递药系统MSN-PEG-IP(MPI)作为药物载体携带阿霉素(DOX)在胶质瘤靶向治疗中的可行性及治疗效果。方法免疫组化和蛋白质印迹法检测胶质瘤及正常脑组织中的IL-13Rα2表达情况,分析其作为特异性靶点的可行性;体外水平通过荧光显微镜验证MPI作为药物载体靶向治疗胶质瘤性能;构建荷瘤大鼠模型,尾静脉给药,通过荧光显微镜和荧光分光光度计观察并检测DOX在大鼠体内的分布情况,评估MSN-PEG-IP/DOX(MPI/D)在体内水平靶向治疗胶质瘤的可行性;通过核磁共振成像(MRI)连续3周观察荷瘤大鼠给药前后颅内肿瘤的大小形态变化,免疫荧光检测肿瘤的增殖、凋亡情况,综合评估MPI/D在大鼠体内对胶质瘤的靶向治疗效果;透射电子显微镜(TEM)观察MPI/D在大鼠体内主要脏器的分布情况;构建荷瘤裸鼠,尾静脉给药后,通过活体荧光成像验证MPI/D在体内水平对胶质瘤的靶向能力;MSN/DOX(M/D和MSN-PEG/DOX(MP/D)在本实验中作为对照组。结果免疫组化检测提示IL-13Rα2在胶质瘤中的表达明显高于正常脑组织,且随恶性程度的增加,其表达量也增加,生存曲线分析显示IL-13Rα2低表达组的患者术后生存时间明显较IL-13Rα2高表达组长,提示IL-13Rα2适合作为特异性靶点;与M/D和MP/D相比,荧光显微镜及荧光分光光度计检测发现各组DOX均主要分布于细胞核中,MPI/D在各类胶质瘤细胞及肿瘤区域中的DOX红色荧光强度更高,差异具有统计学意义,而体外正常星形胶质细胞系及体内正常脑组织中未见明显增加;活体荧光检查也显示MPI/D在荷瘤裸鼠瘤区内的含量最高;TEM证实MPI/D在大鼠胶质瘤区域中的含量明显多于正常脑组织;MRI及免疫荧光检测显示MPI/D在荷瘤大鼠体内能促进胶质瘤细胞凋亡并抑制增殖,治疗效果最佳。结论本实验研究证实了IL-13Rα2适合作为靶向治疗中的特异性靶点;MPI靶向递药系统携带DOX后在体内外对胶质瘤均具有良好的靶向性能,且在荷瘤大鼠模型中对胶质瘤具有确切的靶向治疗效果,MPI靶向递药系统为临床胶质瘤靶向治疗提供了新的方法。
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