自然流产是一种严重影响妇女身心健康的疾病。自然流产病因复杂，除遗传性因素、内分泌失调、生殖系统结构畸形等以外，约有60%患者原因不明，近年来研究表明，在这部分患者当中免疫异常占有重要地位。对母体来说，胎儿是一种异基因或半异基因移植物，但胎儿却不被母体免疫系统排斥，正常妊娠的维持依赖于母胎之间的免疫耐受，一旦这种免疫格局打破，母胎免疫耐受失衡，将可能导致包括自然流产在内的病理妊娠。真核细胞翻译起始因子5A（eukaryotic initiation factor5A，eIF5A）是目前唯一发现的含有特殊氨基酸羧腐胺赖氨酸（hypusine）残基的蛋白质，人和小鼠eIF5A有2种分型：eIF5A-1和eIF5A-2。eIF5A最初由于被发现参与了蛋白质的翻译启始过程而命名真核细胞翻译起始因子。但随后发现eIF5A对于真核细胞大多数蛋白质的合成并非必需，而仅参与部分蛋白质的合成，其具体生理功能仍不是十分清楚。在课题组前期的研究中，行双向电泳和质谱分析小鼠子宫淋巴细胞中表达差异蛋白，共发现24个差异表达蛋白点，其中自发流产NOD小鼠eIF5A蛋白表达水平显著降低，我们推测eIF5A表达降低可能与流产的发生发展有关。eIF5A与自然流产的相关性及eIF5A在流产中的作用及可能机制目前国内外尚无报道。本课题通过Real-time PCR及western blot方法检测了eIF5A在人不明原因自然流产及人工流产蜕膜组织中，以及在自然流产模型小鼠和正常生育力对照组小鼠子宫中的表达情况，发现人类不明原因自然流产蜕膜及自然流产模型孕鼠子宫中eIF5A mRNA和eIF5A蛋白的表达均显著低于对照组。此外，我们通过动物实验及流式检测发现eIF5A抑制剂GC7可导致BALB/c孕鼠胚胎流产率增加，引起子宫及脾脏NK细胞比例减少。我们进一步通过磁珠分选NK细胞体外培养，研究抑制eIF5A对NK细胞的影响及其作用机制。通过免疫荧光染色检测NK细胞eIF5A蛋白的表达及其定位变化，CCK8法检测细胞增殖，Annexin V-PI双染色法检测NK细胞早期凋亡，原位末端脱氧核苷酸转移酶标记技术，DNA片段化分析检测NK细胞晚期凋亡，JC-1荧光探针检测线粒体跨膜电位的变化；流式细胞术，western blot等方法检测凋亡相关蛋白变化。结果显示eIF5A抑制剂GC7引起eIF5A蛋白亚细胞定位发生变化，抑制NK细胞增殖，同时通过外源性及内源性凋亡途径促进NK细胞凋亡。我们的实验结果提示：抑制eIF5A减少NK细胞数量，导致NK细胞功能失调，可能是其引起流产率增加的原因之一。