目的:通过检测脓毒症患者与健康志愿者血中氨基酸水平,了解机体不同状态下血中氨基酸谱的变化特点,以及不同临床结局时脓毒症患者血氨基酸谱情况,为脓毒症患者的合理营养治疗提供线索和依据。方法:选取2014年6月至2014年12月入住大连医科大学附属第一医院重症医学科脓毒症患者63例以及同期健康志愿者51例作为研究对象。采集患者(入ICU时及第2、4、6天)和健康志愿者(空腹时)静脉血,取3滴置于串联质谱滤纸片上,待标本晾干后,统一收集并密封送检,采用液相色谱串联质谱(lquid chromatography tandem-mass spectrometry,LC-MS/MS)技术测定20种氨基酸。详细记录患者的临床资料,包括姓名、性别、年龄、基础疾病、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、前白蛋白(PA)、白蛋白(ALB)、ICU住院时间以及所有纳入研究对象(患者和志愿者)的血氨基酸检测值,并录入《临床信息调查表》。研究对象按脓毒症患者与健康志愿者、脓毒症患者是否死亡进行分组,分析脓毒症是否与特定的血中氨基酸水平变化相关。整理血中氨基酸检测值和临床数据,对数据进行统计学分析。结果1.入ICU时,脓毒症患者与健康志愿者ALB、PA水平的比较脓毒症患者ALB(29.87±5.55g/L)、PA(131.40±82.32mg/L)均低于健康志愿者(分别为32.94±4.71g/L、178.94±65.52mg/L),差异有统计学意义(P分别为0.002和0.001)。脓毒症患者死亡组ALB水平(28.91±5.61g/L)、PA水平(124.59±79.74mg/L)与存活组(分别为30.59±5.47g/L、136.50±84.96mg/L)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。2.入ICU时,脓毒症患者与健康志愿者全血氨基酸水平的比较(M为中位数,iqr为四分位数范围)2.1支链氨基酸(bcaa)包括亮氨酸(leu)、缬氨酸(val)及异亮氨酸(ile,本研究未检测)。脓毒症患者leu(m81.61μmol/l,iqr52.83~141.96μmol/l)、val(m98.22μmol/l,iqr64.02~152.08μmol/l)均低于健康志愿者(分别为m104.76μmol/l,iqr78.8~136.13μmol/l;m126.23μmol/l,iqr100.75~162.51μmol/l),差异有统计学意义(p分别为0.016和0.002)。死亡组leu(m74.21μmol/l,iqr51.83~124.52μmol/l)、val(m86.82μmol/l,iqr63.12~142.23μmol/l)与存活组(分别为m87.04μmol/l,iqr56.92~151.28μmol/l;m100.02μmol/l,iqr69.96~157.15μmol/l)比较,差异均无统计学意义(p>0.05)。2.2芳香族氨基酸(aaa)包括苯丙氨酸(phe)、酪氨酸(tyr)及色氨酸(trp)。脓毒症患者phe(m56.51μmol/l,iqr41.72~76.44μmol/l)与健康志愿者(m59.96μmol/l,iqr52.83~71.47μmol/l)比较,差异无统计学意义(p>0.05)。死亡组phe(m63.67μmol/l,iqr44.37~87.37μmol/l)与存活组(m52.84μmol/l,iqr40.02~74.76μmol/l)比较,差异也无统计学意义(p>0.05)。脓毒症患者tyr(m32.95μmol/l,iqr24.01~43.85μmol/l)低于健康志愿者(m40.36μmol/l,iqr33.1~52.44μmol/l),差异有统计学意义(p=0.018)。死亡组tyr(m30.89μmol/l,iqr23.73~44.03μmol/l)与存活组(m33.59μmol/l,iqr24.04~43.78μmol/l)比较,差异无统计学意义(p>0.05)。脓毒症患者trp(m36.50μmol/l,iqr28.23~43.21μmol/l)高于健康志愿者(m18.62μmol/l,iqr15.89~20.91μmol/l),差异有统计学意义(p=0.0001)。死亡组trp(m34.09μmol/l,iqr27.25~43.21μmol/l)与存活组(m38.06μmol/l,iqr28.41~44.57μmol/l)比较,差异无统计学意义(p>0.05)。2.3含硫氨基酸(saa)包括甲硫氨酸(met)、半胱氨酸(cys)、胱氨酸(本研究未检测)。脓毒症患者met(m14.91μmol/l,iqr10.06~22.75μmol/l)略低于健康志愿者(m19.77μmol/l,iqr14.22~23.48μmol/l),差异无统计学意义(p>0.05)。死亡组met(m14.41μmol/l,iqr9.04~23.42μmol/l)与存活组(m16.68μmol/l,iqr10.88~21.92μmol/l)比较,差异也无统计学意义(p>0.05)。脓毒症患者cys(m1.04μmol/l,iqr0.55~1.87μmol/l)高于健康志愿者(m0.21μmol/l,iqr0.19~0.26μmol/l),差异有统计学意义(p=0.0001)。死亡组cys(m0.79μmol/l,iqr0.45~1.71μmol/l)低于存活组(m1.24μmol/l,iqr0.71~2.25μmol/l),差异也有统计学意义(p=0.044)。2.4与血氨转运及尿素生成相关的氨基酸包括丙氨酸(ala)、谷氨酰胺(gln)、谷氨酸(glu)、天冬氨酸(asp)、天冬酰胺(asn)、鸟氨酸(orn)、瓜氨酸(cit)及精氨酸(arg)。脓毒症患者ala(m88.97μmol/l,iqr55.05~125.14μmol/l)低于健康志愿者(m155.4μmol/l,iqr123.21~172.96μmol/l),差异有统计学意义(p=0.0001)。死亡组ala(m89.42μmol/l,iqr58.32~127.18μmol/l)与存活组(m84.87μmol/l,iqr54.85~125.67μmol/l)比较,差异无统计学意义(p>0.05)。脓毒症患者gln(m6.14μmol/l,iqr2.86~12.73μmol/l)、glu(m108.21μmol/l,iqr67.57~157.898μmol/l)、asp(m36.00μmol/l,iqr21.45~67.44μmol/l)与健康志愿者(分别为m7.18μmol/l,iqr6.37~8.31μmol/l;m107.90μmol/l,iqr98.57~122.02μmol/l;m38.15μmol/l,iqr30.4~50.89μmol/l)比较,差异均无统计学意义(p>0.05)。死亡组gln(m4.74μmol/l,iqr2.44~10.45μmol/l)、glu(m116.34μmol/l,iqr71.34~157.89μmol/l)、asp(m34.00μmol/l,iqr17.00~68.72μmol/l)与存活组(分别为m7.39μmol/l,iqr3.15~13.19μmol/l;106.94μmol/l,iqr66.49~158.01;m40.72μmol/l,iqr21.71~65.72μmol/l)比较,差异均无统计学意义(p>0.05)。脓毒症患者asn(m63.56μmol/l,iqr41.24~94.92μmol/l)高于健康志愿者(m45.93μmol/l,iqr33.92~56.78μmol/l),差异有统计学意义(p=0.00057)。死亡组asn(m63.45μmol/l,iqr37.38~86.07μmol/l)与存活组(m63.98μmol/l,iqr41.71~104.50μmol/l)比较,差异无统计学意义(p>0.05)。脓毒症患者orn(m44.58μmol/l,iqr11.21~83.89μmol/l)与健康志愿者(m35.73μmol/l,iqr32.02~44.08μmol/l)比较,差异无统计学意义(p>0.05)。死亡组orn(m40.54μmol/l,iqr15.50~68.85μmol/l)与存活组(m47.54μmol/l,iqr11.00~105.99μmol/l)比较,差异也无统计学意义(p>0.05)。脓毒症患者cit(m12.30μmol/l,iqr5.91~16.70μmol/l)低于健康志愿者(m19.79μmol/l,iqr15.16~26.19μmol/l),差异有统计学意义(p=0.0001)。死亡组cit(m13.46μmol/l,iqr5.91~14.78μmol/l)与存活组(m10.53μmol/l,iqr5.49~17.79μmol/l)比较,差异无统计学意义(p>0.05)。脓毒症患者arg(m10.80μmol/l,iqr2.51~16.70μmol/l)与健康志愿者(m14.26μmol/l,iqr10.71~18.77μmol/l)比较,差异无统计学意义(p>0.05)。死亡组arg(m7.80μmol/l,iqr2.51~21.89μmol/l)与存活组(m13.99μmol/l,iqr2.52~34.62μmol/l)比较,差异也无统计学意义(p>0.05)。2.5其它氨基酸包括苏氨酸(thr)、甘氨酸(gly)、脯氨酸(pro)、丝氨酸(ser)及赖氨酸(lys)。脓毒症患者苏氨酸(thr)(15.06μmol/l,iqr10.31~22.43μmol/l)、甘氨酸(gly)(m136.48μmol/l,iqr91.75~197.05μmol/l)、脯氨酸(pro)(175.91μmol/l,iqr89.71~299.55μmol/l)、丝氨酸(ser)(m30.87μmol/l,iqr22.77~40.64μmol/l)均低于健康志愿者(分别为m32.19μmol/l,iqr26.68~39.72μmol/l;m187.32μmol/l,iqr168.37~201.29μmol/l;m262.56μmol/l,iqr200.73~318.53μmol/l;m101.00μmol/l,iqr91.19~116.02μmol/l),差异均有统计学意义(p分别为0.0001、0.0001、0.0044和0.0001)。死亡组thr(m13.30μmol/l,iqr9.98~17.33μmol/l)、gly(m122.08μmol/l,92.98~197.05μmol/l)、pro(m202.55μmol/l,iqr93.60~266.06μmol/l)、ser(m28.07μmol/l,iqr21.92~34.82μmol/l)与存活组(分别为m16.46μmol/l,iqr11.59~25.34μmol/l;m136.84μmol/l,iqr86.06~192.70μmol/l;m162.10μmol/l,iqr85.05~340.62μmol/l;m34.12μmol/l,iqr23.74~50.86μmol/l)比较,差异均无统计学意义(p>0.05)。脓毒症患者赖氨酸(lys)(m54.51μmol/l,iqr26.25~119.93μmol/l)高于健康志愿者(m7.18μmol/l,iqr6.37~8.31μmol/l),差异有统计学意义(p=0.0001)。死亡组lys(m47.36μmol/l,iqr24.36~104.48μmol/l)与存活组(m65.93μmol/l,iqr26.46~130.08μmol/l)比较,差异无统计学意义(p>0.05)。3.脓毒症患者全血氨基酸水平的动态变化入icu时,死亡组cys水平明显低于存活组,差异有统计学意义(p<0.05);但第2、4、6天,死亡组cys水平与存活组比较,差异均无统计学意义(p>0.05)。余氨基酸水平不同时间点进行组间比较,差异均无统计学意义(p>0.05)4.脓毒症患者全血各氨基酸中位数水平的动态变化4.1bcaa:死亡组val中位数水平始终低于存活组,而leu中位数水平动态变化无特殊规律。4.2 AAA:死亡组Phe中位数水平始终高于存活组,而Tyr、Trp中位数水平动态变化无特殊规律。4.3 SAA:死亡组Cys中位数水平始终低于存活组,而Met中位数水平动态变化无特殊规律。4.4与血氨转运及尿素生成相关的氨基酸:死亡组Gln、Orn、Arg中位数水平始终低于存活组,而死亡组Asn中位数水平始终高于存活组,余Ala、Glu、Asp、Cit动态变化无特殊规律。4.5其它氨基酸:死亡组Thr、Ser、Lys中位数水平始终低于存活组,而Gly、Pro中位数水平动态变化无特殊规律。结论1.入ICU时,脓毒症患者Leu、Val、Tyr、Ala、Cit、Thr、Gly、Pro、Ser水平均下降,Trp、Cys、Asn、Lys水平升高,余氨基酸水平无明显变化。2.入ICU时,脓毒症患者中死亡组Cys水平明显下降,余氨基酸水平无明显变化。3.动态监测脓毒症患者血氨基酸水平,死亡组Val、Cys、Gln、Orn、Arg、Thr、Ser、Lys中位数水平始终低于存活组,而Phe、Asn中位数水平始终高于存活组,这些氨基酸可能与脓毒症患者预后有关。