选题依据:随着我国经济的高速发展，人们的生活方式发生了巨大的变化，心血管疾病已日益成为重大公共卫生问题，患者数量快速增长。我国传统中医药黄芪对该疾病具有较好的疗效，黄芪注射液自上市以来被广泛运用于该疾病的临床治疗中，其治疗冠心病和改善心室重构等方面疗效明显。而在黄芪注射液部颁标准中，目前仅对黄芪甲苷规定了含量限度，对其他成分则未给予说明，其质量易随着药材物质组成和含量的变化而变化。黄芪总皂苷是黄芪心血管活性的主要药效成分，提取纯化黄芪总皂苷，建立一套稳定可行的生产工艺，并分析提取物的化学组成，为研制成有效部位含量更高的5类新药提供基础，符合现行的新药审批办法。　　目的:研发出一套适合工业化大生产、稳定可靠的黄芪总皂苷制备工艺，明确原料药材来源，并建立黄芪总皂苷提取物化学成分的定性定量分析方法，从而得到有效成分含量高和化学组成明确的提取物，为企业原料选材均一性和后续制剂安全性提供理论依据。　　方法:（1）通过HPLC-ELSD法测定不同来源黄芪药材中的黄芪甲苷含量，根据其含量的高低并结合市场现状初步筛选药材，初筛出的药材按照工艺路线制备黄芪总皂苷，通过对黄芪总皂苷质量的检测确定最终药材来源。（2）首先，对现有制备工艺进行分析研究；其次，以黄芪甲苷和总皂苷含量为指标，选择最佳的制备工艺路线，接着对提取溶剂、碱化、洗脱条件和离心操作中的各项参数进行优化，从而确立最优工艺参数；最后，放大工艺验证其合理性。（3）通过化学成分对照品及相关文献定性识别黄芪总皂苷提取物的HPLC-UV-ELSD、NMR和UPLC-MS/MS图谱中的色谱峰，全面揭示其物质组成，在此基础上，建立黄芪总皂苷6种组分含量HPLC-UV-ELSD同时测定方法和黄芪总皂苷紫外分光光度测定法。　　结果:（1）测定12批不同来源黄芪药材的黄芪甲苷含量，根据含量结果并结合市场现状初步筛选药材为山西产黄芪HQ-SX-1和河北产黄芪HQ-HB-1，进一步对两者的提取物进行质量分析，黄芪HQ-HB-1提取物的黄芪甲苷含量均值为41.24％，黄芪总皂苷含量均值为62.58%；黄芪HQ-SX-1提取物的黄芪甲苷含量均值为74.58%，黄芪总皂苷含量均值为83.64%。综合考虑确定原料药材为HQ-SX-1，即药材来源为基源:膜荚黄芪；产地:山西长治；种植方式:栽培；年限:2年生。　　（2）确定了黄芪总皂苷的制备工艺:取药材黄芪500g，剪碎，以12倍量水浸泡1h，煎煮2h，共三次，合并提取液，滤过除去沉淀。将滤液浓缩至0.5g·ml-1，浓缩液通过AB-8大孔吸附树脂柱（Φ:H=1:10）。以10 BV（柱体积）去离子水洗脱，除去水溶性杂质。先后用5 BV0.2%的NaOH水溶液、5 BV40%的乙醇、5 BV95%的乙醇洗脱，收集95％乙醇洗脱液；取95％乙醇洗脱液，低温浓缩至干，加水复溶后离心，取沉淀80℃真空干燥3 h至恒重，得黄芪总皂苷固体。　　（3）对提取物进行化学成分定性定量研究，从HPLC-UV-ELSD图谱中指认出5个黄酮类成分（芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-?-D-吡喃葡萄糖苷、2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基-异黄烷-7-O-?-D-葡萄糖苷、3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷和7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷）和黄芪甲苷；从提取物的NMR图谱中共指认出9种物质，除了上述6种物质外，还指认出黄芪皂苷Ⅲ、胆碱和甲酸；从提取物的UPLC-MS/MS图谱中共指认出15个化合物，包括蔗糖、谷甾醇、7个黄酮类化合物和6个皂苷类化合物，但未指认出7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷，由此可见，三种技术手段相互验证，互为补充。在化学成分定量测定上，本研究对HPLC-UV-ELSD中的6种化学成分进行了定量测定，黄芪总皂苷提取物中黄芪甲苷含量约占75%，黄酮类成分含量约占5%，黄芪总皂苷含量大于80%，黄芪甲苷转移率达到55%以上，本研究可对黄芪总皂苷提取物约80%的成分进行定量。　　结论:黄芪总皂苷制备工艺的原料药材为：膜荚黄芪、山西长治、栽培2年生；制备工艺为：取药材黄芪500 g，剪碎，以12倍量水浸泡1 h，煎煮2 h，共三次，合并提取液，滤过除去沉淀。将滤液浓缩至0.5 g·ml-1，浓缩液通过AB-8大孔吸附树脂柱（Φ: H=1:10）。以10 BV（柱体积）去离子水洗脱，除去水溶性杂质。先后用5 BV0.2%的NaOH水溶液、5 BV40%的乙醇、5 BV95%的乙醇洗脱，收集95％乙醇洗脱液；取95％乙醇洗脱液，低温浓缩至干，加水复溶后离心，取沉淀80℃真空干燥3 h至恒重，得黄芪总皂苷固体；所得提取物中黄芪甲苷含量应≥40.0%，黄芪总皂苷含量应≥80.0%。