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本文对淡水微藻莱茵衣藻的转化方法进行了优化，建立了较为完善的电击转化高效表达系统。研究了8种海洋微藻对8种陆生植物基因工程中经常使用的选择剂的敏感性，首次研究了金藻基因工程的选择剂，随后又进一步探索了金藻的转化方法。具体研究内容和结果如下：1．确定了莱茵衣藻在SE培养基中对Zeocin的敏感性，在液体培养基中1μg/ml Zeocin就可以抑制莱茵衣藻的生长，在固体培养基中10μg/ml Zeocin就可以抑制莱茵衣藻的生长。优化了电击法转化莱茵衣藻的电容、电场强度、温度和渗透剂等4个参数。高的转化率只有在电容为3.0×125μF及用渗透剂20mM山梨醇+20mM甘露醇时，处理温度为0℃+室温（电击前在冰上放置30分钟，电击后置于15-25℃培养）才能得到。得到的转化株在无选择压的情况下已稳定保存了8个月。2．研究了在陆生植物转基因时常用的抗生素如潮霉素、氯霉素、G418、链霉素、头孢霉素、zeocin等及除草剂PPT，氨甲喋呤对海洋单细胞藻—叉鞭金藻（Dicrateria inornata）、扁藻（PlatymonasSP.）、小球藻（Chlorella SP.）、塔胞藻（Pyramidomonas SP.）、牟氏角毛藻（Goniotrichum alsidii）、三角褐指藻（PorphyridiumSP.）、新月菱形藻（Nitzschia closterium）、紫球藻（Porphyridiumcruentum）的敏感性。结果表明：叉鞭金藻和肩藻对zeocin、G418、氯霉素较敏感，在液体培养基中100μg/ml Zeocin、100ug/ml的G418、340μg/ml的氯霉素可抑制叉鞭金藻的生长；在液体培养基中200μg/ml Zeocin、600μg/ml的G418、340μg/ml的氯霉素可抑制扁藻的生长。塔胞藻、牟氏角毛藻、小球藻、三角褐 指藻、新月菱形藻、紫球藻对潮霉素、G4、氯霉素、链霉素、 头泡霉素、氨甲碟吟、PPT、zeoc i n不敏感，不宜作为它们的选 择剂。G4、氯霉素、Zeocin适宜作为叉鞭金藻和扁藻转化的选 择剂。从实用化转基因的要求来看，我们需要在最短时间内筛选 出转化藻株，而本试验中 G4、氯霉素、Zeocin抑制叉鞭金藻 和扁藻生长的时间较长，因此需要进一步优化选择条件。 3．研究了叉鞭金藻在淡化10 倍的培养基中对腐草霉素家族的 Zeocin的敏感性，并用寇氏法计算zeocin对叉鞭金藻的半致死剂 量。当叉鞭余藻的细胞数目大约为 10‘个／ml 时，48 ’J’时的 LD。。二4．457。g／ml，95％的可信度为 3．452－5．462。g／ml，72 ’J’时 的 LD；。＝l．85 u g／ml，95％的可信度为 0．83－2．87 u g／ml。以完整 的叉鞭余藻细胞为受体，以编码对腐草霉素家族有很强亲和力的 蛋白的 BLE基因作为选择标记，采用电击法，在 500－2500 V／cm 电场强度的范围内比较不同电场强度对金藻细胞的存活率。结果 表明，电场强度大于 1000 V止m时细胞的存活率很低（0～11％）， 500～1000 V／cm 的处理细胞存活率较高（450～66O），500 V／cm 的电场强度下细胞存活率最高。但转化子在选择压 门。g／ml Zeocin)下存活时间过短，只有用 800 V儿m 处理的转化子能在 培养液中能存活15天。