基于“异病同证”理论对慢性乙型肝炎与慢性胃炎脾胃湿热证相关特异性microRNA的验证研究

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目的对前期芯片筛选结果中具有显著差异表达microRNA进一步行临床验证,将目的microRNA的表达变化情况与筛选结果进行比对,以期获得慢性乙型肝炎脾胃湿热证与慢性胃炎脾胃湿热证的特征性microRNA,从microRNA角度进一步明确脾胃湿热证的生物学基础和科学内涵,探讨中医学“异病同证”的潜在生物学标志物,为中医证候诊断提供科学的客观化依据。方法选取课题组前期筛选出的显著差异表达microRNA,慢性乙型肝炎脾胃湿热证与慢性胃炎脾胃湿热证两证共同表达microRNA4条,分别为:hsa-miR-483-3p、hsa-miR-223-3p、hsa-miR-4419b、hsa-miR-1273g-3p。研究对象设为慢性乙型肝炎脾胃湿热证组、慢性胃炎脾胃湿热证组及健康对照组,各13例,取患者和健康志愿者肘静脉全血标本,采用qRT-PCR实时荧光定量法对其血液样本进行microRNA检测获得表达量。本研究中所有资料均采用Spss.20软件进行统计学分析。结果(1)慢性乙型肝炎脾胃湿热证组与健康对照组对比,hsa-miR-483-3p、hsa-miR-1273g-3p在慢性乙型肝炎脾胃湿热证表达上调,差异有统计学意义(P<0.05),与前期筛选结果一致;hsa-miR-223-3p在慢性乙型肝炎脾胃湿热证表达上调,差异有统计学意义(P<0.05),与前期筛选结果不一致;phsa-miR-4419b差异无统计学意义(P>0.05)。(2)慢性胃炎脾胃湿热证组与健康对照组对比,hsa-miR-483-3p在慢性胃炎脾胃湿热证表达上调,差异有统计学意义(P<0.05),与前期筛选结果一致;hsa-miR-223-3p、hsa-miR-1273g-3p、hsa-miR-4419b差异无统计学意义(P>0.05)。(3)慢性乙型肝炎脾胃湿热证组与慢性胃炎脾胃湿热证组对比,hsa-miR-483-3p、hsa-miR-223-3p、hsa-miR-1273g-3p、hsa-miR-4419b差异均无统计学意义(P>0.05)。结论1.hsa-miR-483-3p在慢性乙型肝炎脾胃湿热证组与慢性胃炎脾胃湿热证组中均表达上调且有统计学意义,说明hsa-miR-483-3p与脾胃湿热证具有一定的相关性,可能为脾胃湿热证的潜在生物学标志物。2.hsa-miR-1273g-3p在慢性乙型肝炎脾胃湿热证组中表达上调且具有统计学意义,与慢性乙肝炎脾胃湿热证具有一定相关性,具有潜在生物学标志物意义。3.本研究获得脾胃湿热证的特异性microRNA,证实了“异病同证”之间确实存在相同或相似的微观机制,从microRNA角度进一步探明脾胃湿热证的生物学基础和科学内涵。
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