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中国对虾(Fenneropenaeus chinensis),隶属节肢动物门(Arthropoda),甲壳纲(Crustacea),十足目(Decapoda),游泳亚目(Natantia),对虾科(Penaeidae),明对虾属(Fenneropenaeus),为我国近海特有的品种,主要分布在黄海、渤海和朝鲜西部沿海,是我国海水养殖的主要种类。由于消费需求旺盛,中国对虾是水产养殖中最具商业重要性的品种之一。近年来,高密度养殖成为提高对虾养殖产量、降低养殖成本的重要途径,然而,随着水产养殖的不断扩大和过度集约化,种群个体之间对资源、空间的竞争,将导致动物在生长、能量生理及免疫功能等一系列变化,最终可能会导致动物生存能力降低,影响中国对虾的生长和存活。本文研究了中国对虾的不同阶段的适宜密度,探究密度胁迫下中国对虾的生长、神经内分泌调节机制以及代谢途径、免疫等变化及密度胁迫下饲料添加维生素C和低聚糖对中国对虾的影响等,进一步为中国对虾健康养殖提供技术支撑。其主要结果如下:1.密度胁迫对中国对虾幼虾生长、抗氧化系统功能及水质指标的影响通过室内40d养殖实验,研究了4个养殖密度G0(250尾/m3)、G1(500尾/m3)、G2(1000尾/m3)、G3(2000尾/m3)对中国对虾幼虾生长、抗氧化系统功能及水质指标的影响。研究结果表明,养殖20d时G1、G2生长和成活率与G0差异不显著(P>0.05),G3显著低于G0(P<0.05),养殖40d时G1、G2显著低于G0(P<0.05),G3与G0差异极显著(P<0.01)。通过检测血淋巴、肝胰腺、鳃和肌肉组织中抗氧化系统指标发现,中国对虾的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)随密度增加呈先升高后降低趋势:20d时,4种酶的活性在G1和G2中显著高于G0(P<0.05),40d时则显著降低(P<0.05);中国对虾丙二醛(MDA)含量随密度的增加呈上升趋势,G3的MDA含量始终显著高于G0(P<0.05);G1、G2的MDA含量仅在40d肝胰腺中显著高于G0(P<0.05),其它组织内均差异不显著(P>0.05)。不同养殖密度对主要水质指标pH、溶解氧(DO)、亚硝态氮(NO2-N)、硝态氮(NO3-N)、氨态氮(NH3-N)和化学需氧量(COD)无显著影响(P>0.05),均在中国对虾生长的适宜范围内。本研究表明,密度胁迫显著影响中国对虾的生长及抗氧化能力,规格0.08g的对虾养殖20d时适宜密度为1000尾/m3,养殖40d时适宜密度为250尾/m3。2.密度胁迫对中国对虾肌肉应激蛋白、生物胺的影响通过室内7d的养殖实验,研究了不同养殖密度P1(100尾/m3)、P2(200尾/m3)、P3(300尾/m3)、P4(400尾/m3)胁迫下对中国对虾肌肉应激蛋白含量和基因表达量的影响。研究结果表明,在密度胁迫后中国对虾肌动蛋白T2、14-3-3样蛋白、丙酮酸激酶3的蛋白含量先上升后下降,密度越高含量也越高。P2、P3、P4的肌动蛋白T2含量分别在1d、0.5d、0.5d达到最大值,在各时间段均与P1差异显著(P<0.05);P3、P4丙酮酸激酶3含量显著高于P1(P<0.05),在1d时达到最大值,P2与P1差异不显著(P>0.05);P2、P3、P4的14-3-3样蛋白含量在1d时达到最大值,P2、P3显著高于P1(P<0.05),P4与P1差异极显著(P<0.01),实验结束时,只有P4组含量显著高于P1(P<0.05)。在定量RT-PCR中14-3-3样蛋白、丙酮酸激酶3基因表达量上调,蛋白水平和基因水平呈正相关;肌动蛋白T2基因表达量下调,蛋白水平和基因水平呈负相关,3种蛋白的改变可能导致密度胁迫后的对虾肌肉质量下降。在400尾/m3密度下,测定正常胁迫组及去眼柄组在中国对虾血淋巴多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)含量,探究密度胁迫对中国对虾生物胺的影响及高血糖激素(CHH)对生物胺的调控作用,结果表明:密度胁迫下,3种生物胺的含量均发生的显著变化,P2、P3、P4密度组的DA、NE、5-HT含量先上升后下降,分别在1d、3d、5d得到最大值,显著高于P1(P<0.05),之后DA、NE、5-HT含量下降恢复至对照组水平,与P1差异不显著(P>0.05)。去除眼柄后,与未切除眼柄相比,DA含量在12h和1d时显著降低,NE含量在1d和3d显著降低,5-HT含量在3d、5d时显著降低,密度胁迫后,3种生物胺均有响应,响应时间由短到长分别为DA、NE、5-HT,这说明CHH可以调节生物胺的含量,但CHH对三种生物胺含量影响程度并不相同。3.密度胁迫对中国对虾生长和代谢物质的影响通过室内28d养殖实验,研究了不同养殖密度P1(100尾/m3)、P2(200尾/m3)、P3(300尾/m3)、P4(400尾/m3)对中国对虾的生长指标、代谢物质含量和代谢酶活力的影响。结果显示:密度胁迫下,中国对虾随密度的增加,成活率、增重率、增长率、相对增长率、特定生长率显著降低(P<0.05);体重差异系数随密度显著增加(P<0.05),P2的各生长指标高于其他组,4.5g养殖28d时适宜密度为200尾/m3。另外,高密度处理组可以显著提高血淋巴血糖、乳酸、丙酮酸、甘油三酯含量,对氨基酸影响不大,说明密度胁迫下,中国对虾倾向性利用糖类脂类作为能源,表明在高浓度的密度胁迫能使碳水化合物和脂类利用增加。因为对能源的需求增加,必须提高可代谢物质的利用。密度越高己糖激酶、丙酮酸激酶和6-磷酸果糖激酶和乳酸脱氢酶活性显著升高。说明机体氧化代谢途径发生变化,分解代谢增强,有氧代谢受到抑制,与此同时,无氧代谢被激活。4.密度胁迫下饲料添加剂对中国对虾生长免疫指标影响通过室内28d养殖实验,研究了400尾/m3密度胁迫下在饲料中添加维生素C和低聚糖对中国对虾的生长、免疫及消化酶的影响。实验分为4个实验组,记为C0(配合饲料)、C1(添加0.1%的Vc)、C2(添加0.16%低聚糖)、C3(混合组,C1和C2添加量的1/2)。实验结果表明:密度胁迫下,饲料添加剂对中国对虾的生长影响显著,顺序为C3>C1>C2,以混合组效果最为明显。C1、C3增重率、增长率、相对增长率和特定生长率均显著高于对照组(P<0.05),C2组各生长指标均高于对照组,只有增长率差异显著(P<0.05),其它差异不显著(P>0.05)。饲料添加剂对密度胁迫下免疫指标的影响:C1、C2、C3组的免疫指标均高于C0组,均在7d时酶活性达到最大值,C1、C3组均显著提高PO、SOD、ACP、溶菌酶4种指标(P>0.05),C3组免疫酶活性高于C1;C2组的PO、ACP、溶菌酶活性显著高于C0(P<0.05)。但只有AKP活性差异不显著(P>0.05)。饲料添加剂对密度胁迫下消化酶的影响:C1、C2、C3组的消化酶活性1d时活性上升,在7d时发挥最大作用,活性高于对照。C1、C3组显著提高了对虾的蛋白酶、淀粉酶、胰蛋白酶3种酶的活性(P<0.05)。C2组显著提高蛋白酶、胰蛋白酶(P<0.05),对淀粉酶没有显著效果(P>0.05)。综上,密度胁迫下,饲料添加Vc和低聚糖,可提高中国对虾的生长速度,在7d内能够在一定程度上提高免疫酶、消化酶活力,混合添加剂效果显著,维生素C次之。说明在短期内可以改善对虾非特异性免疫力,能缓解密度胁迫的影响,长期内效果不显著。