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在人体内，磷脂酶A2（PhospholipaseA2,PLA2）是花生四烯酸炎症通路的限速酶，为早期炎症的重要标志物。PLA2的过度表达可以引起重症胰腺炎、急性缺血性脑损伤、冠心病等多种疾病，然而临床上PLA2抑制剂类的抗炎症药物较少。在蛇血清中存在磷脂酶A2抑制蛋白（Phospholipase A2inhibitor，PLI），它可以中和蛇毒PLA2毒性，而避免自我毒伤。蛇毒PLA2与人PLA2同属于分泌型PLA2家族，具有高度相似的空间结构。蛇PLI蛋白包括α、β和γ三种类型，做为天然的蛇毒sPLA2抑制剂，蛇PLI对于人sPLA2的抑制值得研究。目的：筛选出PLA2抑制蛋白，并依据其氨基酸序列设计模拟肽并验证PLA2抑制活性。方法：收集王锦蛇、银环蛇、金环蛇、颈棱蛇、华游蛇、眼镜蛇的血清，运用琼脂糖平板法和PH动态法检测各血清磷脂酶A2的抑制活性，发现华游蛇血清活性最强；利用SourceQ和UnoQ离子交换层析，对华游蛇血清分离纯化，得到的蛋白通过琼脂糖平板法和小鼠出血毒实验，检测其对蛇毒sPLA2酶活性和出血毒抑制活性；设计兼并引物，用RT-PCR法克隆华游蛇PLIγ序列；通过华游蛇活体诱导实验，检测注射蛇毒前后华游蛇PLIγ表达水平；以华游蛇PLI氨基酸序列为基础设计PLIγ模拟肽，并运用Autodock分子对接软件进行虚拟筛选，如上法检测模拟肽对sPLA2酶活性及出血毒抑制效果；用脂多糖（LPS）诱导raw264.7构建细胞炎症模型，通过检测细胞sPLA2基因表达水平确定细胞炎症，用ELISA法检测花生四烯酸水平，评价模拟肽的抗炎作用。结果：在筛选的6种蛇血清中，华游蛇血具有最强的sPLA2抑制活性，在华游蛇血清中分离得到PLIγ蛋白,该蛋白对sPLA2抑制活性为85%，并能够显著抑制尖吻蝮蛇毒sPLA2出血毒性。通过RT-PCR和测序，从华游蛇肝脏中克隆得到了PLIγ基因，其编码长度约为550bp.此外，华游蛇注射蛇毒PLA2后，PLIγ表达水平显著上升，进一步验证了华游蛇PLIγ抗蛇毒保护作用。基于华游蛇序列的活性区，设计得到一个长度为19aa的模拟肽，序列PGLPLSYPNGGGGSVAFRS。Autodock分子对接分析表明该19肽与sPLA2疏水性活性中心结合。该19肽具有较好的sPLA2酶活性和出血毒的抑制活性。此外，19肽对LPS诱导的Raw264.7炎症细胞花生四烯酸生成有抑制作用，IC50为86.3μmlo/L。结论:华游蛇中分离得到的sPLA2抑制蛋白为PLIγ，并且是一个新的蛋白，具有抗蛇毒sPLA2酶和出血毒性，可用于蛇毒中毒的救治。基于华游蛇PLIγ设计得到的19肽，具有类似的活性，并具有一定的抗炎症作用。