海藻酸钠/壳聚糖核壳微球用于活性因子的顺序释放研究

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关节软骨损伤后其自修复能力极为有限。临床上使用常用的治疗方法难以对关节软骨的功能实现稳定的长期修复。利用支架材料、种子细胞和细胞因子的组织工程方法实施关节软骨损伤的修复和治疗已经显现出临床应用前景。蛋白质类细胞因子易失活、体内半衰期短,超剂量使用可造成复杂的副作用。如何在体内合理和有效地使用细胞因子并控制其剂量和持续效应是细胞因子应用面临的主要问题。在关节软骨损伤修复与重建中如何利用体内可降解和生物相容的天然高分子材料局部控制使用单一因子或组合因子一直是该领域研究的热点问题之一。海藻酸钠和壳聚糖是组织工程领域常用的两种天然高分子。由于它们各自的阴离子和阳离子特点,它们已经组合用于制备支架、纤维、水凝胶和微球等。本论文拟将它们组合应用于制备核-壳结构的微球,力图装载两种活性因子以注射方式用于关节软骨损伤修复与重建。乳化法和层层自组装方法被用于制备核-壳结构的海藻酸钠/壳聚糖微球。在自组装方法中,利用正交设计制备结构和直径较为合适的海藻酸钠微球并将该型微球用作核-壳微球的内核。再利用海藻酸钠和壳聚糖为壳层材料在海藻酸钠微球表面实现多层组装。以牛血清白蛋白和卵清蛋白作为模型药物,研究不同浓度的海藻酸钠和氯化钙、不同的组装层数对制备的复合微球的药物包载能力和缓释效果的影响。实验结果证明,牛血清白蛋白的释放速率随着组装层数的增加而减慢,与未进行组装的海藻酸钠微球相比具有壳层结构的海藻酸钠/壳聚糖微球的药物释放速率显著降低。然而,实验结果表明,利用自组装技术获得的海藻酸钠/壳聚糖微球,在内核中可有效加载模型药物,但在壳层中难以有效加载模型药物。利用直接乳化交联法制备了海藻酸钠/壳聚糖核-壳型微球。该型微球具有较好的成球性、合适的粒径大小和粒径分布。与未使用京尼平交联剂的微球相比,京尼平交联的海藻酸钠/壳聚糖微球的载药量和包封率显著提高,内核加载的牛血清白蛋白的释放速率也显著变慢。对所释放牛血清白蛋白的圆二色谱分析得出,微球所载牛血清白蛋白可较好保持其二级结构。由此得出,直接乳化交联法制备的海藻酸钠/壳聚糖核-壳型微球可较好控制内核所载药物的释放。通过后续对壳层结构和壳层所加载活性分子的研究,海藻酸钠/壳聚糖核-壳型微球有望实现活性因子顺序释放,从而在软骨组织工程中具有潜在的应用价值。
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