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目的：探讨内皮细胞特异性分子2(ECSM2)的功能学表位,ECSM2与其他内皮细胞特异性分子之间的关系,ECSM2对内皮细胞功能的影响,以及ECSM2分子在血管新生性疾病组织中的表达。方法：1.利用CBS Prediction Servers生物信息学软件预测ECSM2分子功能学表位；通过定点PCR突变技术将胞外段第54位酪氨酸突变为丙氨酸(Y54A),构建表达Y54A突变的ECSM2真核表达载体pECSM2Y54A GFP和pECSM2Y54A3FLAG。2.将真核表达ECSM2wild type和Y54A突变的质粒分别转染293T细胞,通过免疫荧光和免疫共沉淀明确ECSM2分子的膜定位和酪氨酸磷酸化位点；通过划痕实验和跨孔实验检测ECSM2分子对细胞迁移的影响。3.用血管内皮细胞生长因子(VEGF)刺激人脐静脉内皮细胞HUVEC,利用免疫印迹和免疫共沉淀检测ECSM2分子与VE-Cadherin分子之间的关系。4.将HUVEC细胞接种Matrigel,用Real Time PCR检测体外血管新生过程中ecsm2基因表达水平的变化；用siRNA干扰技术抑制ecsm2基因表达,用Tube formation assay和in vitro permeability assay观察对体外血管形成及血管稳定性的影响。5.收集46例肝脏恶性肿瘤标本(包括肿瘤组织和癌旁组织),做免疫组化分析,结合病人资料采用SAS9.2统计软件进行数据分析。结果：1. ECSM2分子胞外段潜在功能位点为1个酪氨酸磷酸化位点(Y54, tyrosine)、12个丝／苏氨酸磷酸化位点、1个N-糖基化(N96, Asparagine)和23个O-糖基化位点。胞内段有7个可能的丝氨酸磷酸化位点。2. ECSM2分子胞外段第54位酪氨酸残基突变(Y54A)不影响ECSM2分子的膜定位；该位点被证实为酪氨酸磷酸化位点。Y54A突变解除了ECSM2分子对细胞迁移的抑制。3. VEGF刺激HUVEC,促进ECSM2与VE-cadherin分子间结合。4. ECSM2分子在体外血管形成中转录水平降低,与血管稳定性维持相关。5. ECSM2在肝脏恶性肿瘤组织中表达水平升高。结论：ECSM2分子第54位酪氨酸残基是酪氨酸磷酸化位点,该位点突变不影响ECSM2分子膜定位,但阻遏了ECSM2对生长因子诱导性细胞迁移的抑制,提示该位点参与ECSM2分子对细胞迁移的影响机制；在内皮细胞中,VEGF刺激引起ECSM2与VE-cadherin表达增多,分子间结合增强；功能学上,ECSM2分子维持血管稳定性与通透性；在血管新生性疾病,如肝癌组织中,ECSM2分子表达升高。