研究背景人绒毛膜促性腺激素(Human chorionic gonadotropin,HCG)是妊娠特异性标志物,通过测定其浓度高低可以判断是否妊娠。目前,若进行定性检测,一般检测尿液HCG浓度;若要进行定量检测,那么不仅需要采集血样,而且还存在需要专业设备和专业人员、检测时间长、检测步骤复杂的缺点。目前,急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)患者的比例持续上升。研究表明,心肌肌 蛋白I(Cardiac troponin I,cTnI)是一种高特异性和高敏感性的心肌损伤标志物。AMI患者出现胸痛后,血清cTnI浓度在短时间内迅速升高,且存在明显的动态变化,结合心肌缺血证据可早期诊断AMI。因此,快速、准确地定量检测血清cTnI的浓度非常重要。然而,cTnI检测方法同样存在需要专业设备及人员、检测时间长、步骤复杂等缺点。免疫层析检测法是一种融合了层析检测技术与免疫标记技术的快速诊断方法。其不仅有抗原抗体反应的特点,而且以膜为反应载体。该技术操作简便,设备简单,结果实时可靠,可用于许多标志物的检测。超顺磁性纳米微球(Superparamagnetic nanoparticles,SPMNPs)是具有超顺磁性的纳米粒子,其分散性和可操作性良好,能偶联多种具有生物活性的基团。研究目的与意义本研究旨在组建能快速定量检测的HCG磁性免疫层析试纸条、cTnI磁性免疫层析试纸条。两种磁性免疫层析试纸条不仅检测结果准确可信,还克服了检测时间长、步骤复杂的缺点,既利于院外快速定量检测,也适合用于医院检验科、急诊室等。研究内容与方法本研究由两部分实验组成:1、HCG实验;2、cTnI实验。两部分实验均用碳二亚胺法制备相应的免疫磁珠并进行表征,然后组建试纸条并验证免疫磁珠,根据验证结果对免疫磁珠及试纸条进行优化。研究结果1、HCG免疫磁珠的偶联率:45ug抗α-HCG抗体/lmgSPMNPs。2、定性检测HCG的下限为:lmIU/ml;定量检测HCG的下限为:0.27mIU/ml。3、HCG磁性免疫层析试纸条NC膜的型号为Sartorius CN95。4、cTnI免疫磁珠的偶联率:15ug抗cTnI抗体(16A11)/lmgSPMNPs。5、cTnI磁性免疫层析试纸条NC膜的型号为Millipore 135。6、定性检测cTnI的下限为:lng/ml;定量检测cTnI的下限为0.46ng/ml。7、两部分实验结果均提示抗原浓度与T线的显色深浅成正比。研究结论本研究以两种免疫磁珠为探针,组建了两种快速检测的磁性免疫层析试纸条。不仅可以定性检测,还能定量检测。两种试纸条既可以用于临床科室进行床旁快速定量检测,也利于院外快速定量检测。