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近年来中国养殖业中出现了一个的朝阳产业,它慢慢成为了中国养殖业浓墨重彩的一笔,它就是鹅养殖业。制约鹅养殖业及其副业发展的因素有很多其中鹅的季节性产蛋特性是最关键的一环。为了解决这一问题,我们需要研究鹅卵泡的发育原理从而更好的助力鹅养殖业的发展。现在已经有学者研究发现,ERK信号通路可以通过一些途径来调控家禽的等级前卵泡的发育状态。本试验采集籽鹅等级前卵泡并以此为试验样本。使用qPCR技术、Western Blot技术和IHC技术用来检测目的基因mRNA水平以及蛋白质水平的表达情况和目的基因在籽鹅等级前卵泡中的表达位点情况。研究结果如下:(1)qPCR试验技术研究籽鹅等级前卵泡中ERK信号通路中关键基因的mRNA表达水平,并检验其显著性。结果显示,在籽鹅五种等级前卵泡中所有目的基因均有表达并且数据结果存在着显著性差异(p<0.05)。其中Raf1、Myc、Mek1基因的表达规律呈现先增加后减少再增加再减少的“M”型趋势,目的基因Raf1、Myc在LWF中的表达量最高,目的基因Mek1在SWF中的表达量最高;目的基因Hras、Mos、ERK的表达规律呈现持续减少趋势,在PF卵泡中的表达量最高。目的基因Srf的表达规律呈现先减少再增加再减少再增加的“W”型趋势,其表达量在SYF中最高。(2)通过相关性分析qPCR的试验结果,试验结果表明在不同发育阶段的卵泡中ERK信号传导途径中相邻基因之间的相关性存在差异,不同发育阶段的不同等级卵泡的相关性与信号传导途径中任意两个基因的相关性也存在一定的差异。(3)通过免疫组织化学试验对籽鹅五种等级前卵泡中目的蛋白Hras、Mek1和ERK的表达位点进行分析。结果表明,在籽鹅五种等级前卵泡中的颗粒层细胞(GC)和膜层细胞(TC)中都检测出了表达位点,并且结果为阳性表达。(4)通过蛋白免疫印迹技术研究了籽鹅五种等级前卵泡中目的基因Hras、Mek1和ERK的蛋白质表达水平。结果显示,五种等级前卵泡中三种目的蛋白均有表达。其中目的蛋白ERK在SWF中表达量最高,在SYF中表达量最低(P<0.05)。目的蛋白Hras在SWF中表达量最高,在LWF中表达量最低(P<0.05)。目的蛋白Mek1在PF中表达量最高,在MWF中表达量最低(P<0.05)。(5)结合ERK信号通路上基因的表达规律及卵泡发育规律可发现,ERK信号通路对籽鹅等级前卵泡存在一定的促进作用。