【摘 要】
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我国是油菜(Brassica napus)生产大国,油菜栽培面积和产量均居世界前列。由寄生霜霉(Hyaloperonospora parasitica)引起的甘蓝型油菜霜霉病(Downy mildew)是油菜的主要病害之
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我国是油菜(Brassica napus)生产大国,油菜栽培面积和产量均居世界前列。由寄生霜霉(Hyaloperonospora parasitica)引起的甘蓝型油菜霜霉病(Downy mildew)是油菜的主要病害之一,在世界各油菜产区均有发生。在条件适宜的年份和地区,可以导致10%~50%的植株发病,严重时100%发病,使油菜单株减产达10%~50%,霜霉病对油菜产量和生态带来的损失不容忽视。目前霜霉病的防治主要靠化学药物防治,然而难于收到理想的效果而且对环境影响很大,选育抗病品种为目前较为理想的防治方法。分子标记辅助选择育种能大大缩短育种进程,提高抗病育种的效率。本研究通过研究甘蓝型油菜霜霉病病原菌的生物学特性,了解霜霉病的最适发病条件。然后通过田间自然诱发鉴定,筛选出甘蓝型油菜高抗霜霉病品种35710,将高抗品种35710和感病品种33463作为亲本,通过正反交、自交构建F1群体、F2分离群体,研究甘蓝型油菜霜霉病抗性遗传规律。利用F2群体,基于SLAF-seq技术和BSA方法,筛选与霜霉病抗病性相关联的SNP,并基于关联的非同义突变SNP开发易于实验室检测的SNAP分子标记,便于育种过程中的应用。并对与抗病性相关联的区域内基因进行功能注释和富集分析,预测可能参与霜霉病抗性调控的基因和代谢通路,为后续的基因功能验证和克隆分析做铺垫。主要研究结果如下:1.甘蓝型油菜霜霉病病原菌为寄生霜霉(Hyaloperonospora parasitica),霜霉菌孢子的萌发要求相对湿度在80%以上,相对湿度越高孢子的萌发率越高,在蒸馏水中的孢子萌发率最高;霜霉菌孢子的适宜萌发温度为15℃~18℃,相同条件下,当温度为18℃时的萌发率最高;当pH为6~7时,对孢子的萌发抑制作用最小;菌悬液中滴加吐温-20量越少,对孢子萌发的抑制作用越小。2.经鉴定,材料35710为高抗霜霉病的材料。与感病材料33463正反交后,F1代抗性一致,说明抗病性是由核基因控制;将0级和1级认为是抗病病级,将3~9级认为是感病病级,统计发病株数,研究抗性遗传规律,并通过适合性检验检测,结果表明,甘蓝型油菜霜霉病抗病性是由单基因控制,并且呈完全的显性。3.基于SLAF-seq技术和BSA方法对甘蓝型油菜开发分子标记,经过关联分析,得到2个与甘蓝型油菜霜霉病抗病相关的非同义突变的SNP,针对这2个SNP开发SNAP分子标记,经过PCR优化筛选,得到能扩增出抗病标记BDsnp01-A和BDsnp02-G的引物1LR1和2LR1,能扩增出感病标记BDsnp02-C和BDsnp02-A的引物1RR1和2RR3。
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