正常人表皮内朗格汉斯细胞表达CD1a和CD68抗原的研究

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前言 朗格汉斯细胞(LC)是皮肤内重要的具有抗原提呈功能的树枝状细胞,可以表达多种抗原,而这些抗原的表达,与Lc的功能密切相关,在LC处于不同的功能状态下,这些表面抗原的表达亦出现变化。CD68抗原表达于单核-巨噬细胞,是这类细胞的主要标志之一。 目的 研究正常人表皮内朗格汉斯细胞的抗原表达。 材料与方法 1.正常皮肤:健康男性8例,取其面部、躯干、四肢远端3个部位皮肤。 2.试剂:CD1a和CD68单克隆抗体,罗丹明标记羊抗小鼠IgG血清,FITC直接标记的小鼠抗人的CD1a抗体。 3.方法:(1) 免疫组化:ABC过氧化酶技术;(2) 荧光双标记染色 4.判断标准:(1) 免疫组化以胞膜或胞浆呈桔红色为阳性。(2) 免疫荧光染色阳性结果:红色荧光为CD68阳性树突状细胞;亮绿色荧光为CD1a~+的朗格汉斯细胞。(3) 双标记阳性的细胞呈现黄色荧光。 结 果 1.CD1a阳性细胞多为树枝状位于表皮中部,而CD68阳性细胞则在真皮各层分布较多,其中一部分表现为树枝状。 2.CD1a阳性细胞主要位于表皮的中层,其密度是CD68阳性细胞的2.5倍,而CD68阳性细胞主要位于表皮下层和中层,分别占43%和42%,其密度高于CD1a阳性细胞。 3.荧光双标记染色显示在躯干皮肤的表皮中,CD1a阳性细胞多位于表皮的中层,胞体比较大,分支比较多,树枝状突起长而粗,有的互相交织在一起。CD68阳性细胞多位于真表交界处周围的表皮内和真皮浅层,胞体较小,有的呈圆形无明显的树枝状突起;有的细胞有树枝状突起,但分枝少,树枝状突起短而纤细。在躯干皮肤的表皮中,存在CDla和CD68双标记阳性的细胞,这些双标记阳性的细胞明显少于CDla和CD68阳性的细胞。结论 在正常成人表皮内,CDla与CD68两种抗原可共同表达于LC;但表达这两种抗原的细胞在表皮内的分布与密度存在差异,CDla+LC密度明显高于CD68十细胞,且多位于表皮中部;双标记研究显示可能在正常表皮内存在CDla+CD68+的LC、CDla+CD68一的LC以及CDla一CD68+的非LC树枝状细胞三个群体的细胞。
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