近年来,查耳酮作为黄酮和类黄酮的前体化合物,由于其可修饰位点多,能靶向多种生物受体,展现出多种生理活性而被大量研究。肝癌作为死亡率第二的恶性肿瘤,研究显示黄酮类化合物与抗肝癌药物索拉菲尼联合使用能增强其疗效,但具体机制尚不明确。本课题对基于（E）-1,3-二苯基-2-丙烯-1-酮衍生出的14个查尔酮类化合物进行了抗HepG2细胞毒机制研究,结果如下:通过MTT实验对14个抗癌候选查尔酮衍生物进行活性初筛,测试其对四种人类肿瘤细胞（A549,Hela,HepG2和HL-60）和一种正常细胞（WI-38）的细胞毒作用,并探究活性与结构之间的关系。结果显示,被吸电子基团取代的化合物（a1,a2,a3和a4）其IC₅₀通常大于被给电子基团取代的化合物（a11,a12,a13,a14）,我们推测给电子基团（-OCH₃）有助于增强查尔酮衍生物活性。此外,发现a14对HepG2细胞活性最好(IC₅₀=38.33μM),对正常细胞WI-38的毒性较低(IC₅₀=121.29μM),在此基础上建立了HepG2细胞生长曲线和a14对HepG2细胞的药时曲线。之后通过划痕、克隆实验和周期实验发现,a14能够有效阻滞HepG2细胞复制、迁移和侵袭,并有效阻断其于G2/M期进行分裂。化合物a14促HepG2细胞凋亡结果显示,随着药物浓度的增加,早期凋亡百分比增加了24.08%,晚期凋亡增加了26.01%。进一步研究发现,化合物a14能在短期内诱导HepG2细胞ROS大爆发,并引起线粒体膜电位（MMP）丧失,从而导致细胞凋亡。当用NAC抑制细胞内ROS后,HepG2细胞凋亡情况被明显改善。此外,WB结果显示,a14还可通过诱导凋亡相关的Bcl-2家族蛋白以及Caspase家族相关蛋白的表达而引起HepG2细胞凋亡。之后用计算机模拟实验,对14个化合物与Caspase 3和CDK1蛋白进行了对接,发现对接结果良好,且a14与CDK1的结合能最小（-9.02 kcal/mol）,与细胞毒活性实验结果一致。总之,化合物a14可显著抑制HepG2细胞生长、迁移及侵袭,且通过诱导ROS爆发和线粒体凋亡通路引起HepG2细胞凋亡。