CEP135表达与精子活力及精子DNA损伤的相关性研究

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目的精子活力低下所导致的弱精症是男性不育的重要原因之一,深入探讨弱精症的发生机制、提出新的治疗策略是国内外生殖领域的一个研究热点。本实验旨在通过测定弱精症精子细胞的活力、DNA损伤率及中心小体蛋白135(centrosomalprotein135kDa,CEP135)的相关表达量,并探讨CEP135表达与精子活力和精子DNA损伤率之间的相互关系,以确定CEP135在弱精症诊疗过程中的指导价值,并对其作用机制进行初步探讨。方法应用计算机辅助精液分析对91例精液样本进行参数检测,按照WHO标准,根据(a+b)级精子百分率分为3组,Ⅰ组31例:(a+b)级精子>50%或a级精子>25%;Ⅱ组30例:(a+b)级精子25%~50%;Ⅲ组30例:(a+b)级精子<25%。利用精子染色质扩散实验(Sperm chromatin dispersion test,SCD)检测各组精子细胞的DNA损伤率。逆转录-实时定量聚合酶链反应(Reversetranscription-quantitative real-time PCR, RT-qPCR)检测CEP135信使RNA(Messenger RNA,mRNA)在三组精液中的表达情况,采用2-ΔCT公式(ΔCT=CT目的-CT内参)计算目的基因的相对表达量(Relative expression,Re),琼脂糖凝胶电泳验证RT-qPCR的实验结果。应用SPSS16.0软件统计数据并对精子细胞的活力、DNA损伤率及CEP135mRNA的相对表达量进行相关性分析。结果3组精液中精子细胞的活力分别为62.31%±7.97%、36.63%±6.61%、16.51%±6.57%,DNA损伤率分别为17.18%±6.72%、22.86%±6.67%、27.30%±6.44%,CEP135mRNA的平均相对表达量分别为9.45×10-2±2.64×10-4、9.48×10-2±3.24×10-4、9.49×10-2±2.52×10-4,各组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。DNA损伤率及CEP135mRNA的相对表达量均与精子细胞的活力呈显著负相关(r分别为-0.619,-0.574;P均<0.01);随着CEP135mRNA相对表达量的升高,DNA损伤率也逐渐增加,二者之间显著正相关(r=0.316;P<0.01)。结论弱精症精液中高表达的CEP135mRNA与精子细胞活力的降低及DNA损伤率的增高密切相关,具有显著相关性。临床上可以通过测定精子细胞CEP135mRNA的相对表达量来评估患者的精液质量,并通过基因干扰技术影响CEP135mRNA的相对表达量进而改善精液质量,提高弱精症的生育能力。
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