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猪圆环病毒2型（PCV2）是近年来新发现的引起猪繁殖障碍等多种疫病的一种重要病原。PCV2为无囊膜的单股环状DNA病毒，基因组全长约为1767bp，病毒的衣壳蛋白只含有一种衣壳蛋白ORF2，60分子的ORF2蛋白可自主组装产生二十面体对称的病毒衣壳结构。已有报道可利用昆虫细胞与大肠杆菌表达组装产生结构相似的PCV2空衣壳样粒子。本研究旨在以PCV2ORF2衣壳蛋白为骨架，嵌合表达口蹄疫病毒（FMDV）的主要中和表位，测定嵌合表位蛋白的免疫原性，为以PCV2衣壳蛋白为骨架嵌合展示异源表位、研究表位展示疫苗奠定基础。PCV2ORF2蛋白N-端前41个氨基酸为核定位序列（NLS），为衣壳组装的非必需区；PCV2ORF2衣壳蛋白单体由8个β-折叠片层与之间的loop环结构组成，连接BC、DE、FG与HI的loop环长度为4~9aa，连接CD、EF与GH环长度为21~36aa，长loop环对稳定衣壳结构有重要作用。根据上述研究背景，本研究构建了5种改造的PCV2衣壳蛋白，分别为N端NLS序列置换为FMDV中和性抗原表位（O/Mya/98FMDV VP1G-H环133~160与C-端200~213氨酸酸）的嵌合衣壳蛋白；N端NLS序列置换为通用T细胞表位，同时用FMDV VP1G-H环替换CD、EF或GH构建的三种嵌合衣壳蛋白；以及N端置换为T表位，CD、EF和GH分别置换为O型FMDV不同拓扑型病毒的G-H环（O/Mya/98，泛亚系和Cathy拓扑型）构建的嵌合衣壳蛋白，在大肠杆菌中表达的五种嵌合衣壳蛋白分别命名为ORF2-VP1(N)，ORF2-VP1(CD)，ORF2-VP1(EF)，ORF2-VP1(GH)，ORF2-VP1(All)。同时，通过密码子优化改造，在大肠杆菌中表达了完整的PCV2ORF2蛋白。通过C端融合的组氨酸标签对表达蛋白进行亲合层析纯化，利用GSH-GSSG氧化-还原系统复性、纯化蛋白；将复性蛋白加聚肌胞苷酸Poly（I:C）与206制备为油佐剂疫苗免疫小鼠，分别测定其针对FMDV与PCV2的抗体应答水平，以及细胞免疫应答情况，评价不同嵌合表位蛋白的免疫原性。不同嵌合表位蛋白诱导FMDV特异性抗体应答检测显示：PCV2衣壳蛋白N端嵌合FMDV中和性抗原表位未能诱导小鼠产生针对FMDV特异性中和抗体，表明N端不适于嵌合FMDV B细胞表位；用loop替换的4种嵌合表位衣壳蛋白以Poly（I:C）为免疫增强剂免疫小鼠，产生了低水平的FMDV中和性抗体，表明PCV2衣壳蛋白CD/EF/GH环嵌合FMDV中和表位有利于FMDV中和性抗原表位的展示和中和抗体的产生；而未添加Poly（I:C）的3个loop环全替换的嵌合表位衣壳蛋白产生的FMDV中和性抗体水平显著高于添加Poly（I:C）组（P<0.05），提示添加Poly（I:C）似抑制了小鼠针对嵌合表位的体液免疫应答水平，这一现象有待进一步研究核实。细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12水平检测结果表明各免疫组均以Th1型细胞免疫为主。