论文部分内容阅读
目的:通过建立重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型,研究橄榄油脂肪乳(OOLE)对SAP大鼠肠黏膜屏障的影响,以期为临床肠外营养治疗提供一定的理论支持。方法:所有大鼠均行单侧颈外静脉置管,48小时后将30只雄性SD大鼠随机分为三组:对照组(Control组),重症急性胰腺炎模型组(SAP组)及橄榄油脂肪乳干预组(OOLE组)。Control组、SAP组大鼠每天泵入生理盐水,OOLE组泵入橄榄油脂肪乳。5天后Control组行腹部假手术,SAP组及OOLE组采用牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射法行造模手术,24小时后观察大鼠腹腔情况,收集腹水,腹主动脉采血并留取胰腺和小肠组织标本。通过全自动生化仪检测血淀粉酶和脂肪酶含量;通过酶联免疫法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)以及二胺氧化酶(DAO)水平;通过HE染色观察胰腺和小肠组织病理变化,并对小肠绒毛隐窝单位进行形态学测量;通过免疫荧光染色检测小肠上皮增殖细胞核抗原(PCNA)、凋亡相关蛋白酶Caspase-3及细胞紧密连接蛋白ZO-1的表达水平,并通过Image J及Image-Pro plus 6.0软件进行量化分析。结果:(1)与Control组相比,SAP组大鼠造模后腹腔炎症表现明显,腹水生成量显著增加(P<0.01),血淀粉酶、脂肪酶、血清IL-6和TNF-α水平均显著上升(P<0.01);HE染色见胰腺组织大片坏死及炎症细胞浸润;肠黏膜上皮细胞增殖率(PCNA阳性率)降低和凋亡率升高(Caspase-3阳性率)(P<0.01),小肠绒毛高度及隐窝深度值明显下降(P<0.01),肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1表达率显著降低(P<0.01),血清DAO水平显著升高(P<0.01),肠道通透性明显增加。(2)与SAP组相比,OOLE组的血淀粉酶、脂肪酶和血清IL-6水平均无统计学差异(P>0.05);TNF-α水平降低(P<0.05),肠黏膜上皮细胞增殖率升高和凋亡率降低(P<0.05),小肠绒毛高度及隐窝深度值较高(P<0.05);肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1表达率升高(P<0.05),DAO水平降低(P<0.05),肠道通透性降低。结论:(1)SAP模型大鼠炎症相关指标升高,同时伴有肠道黏膜上皮细胞及细胞间紧密连接构成的黏膜屏障受损;(2)OOLE干预能够促进肠黏膜上皮细胞的增殖和减少凋亡,减轻肠道绒毛隐窝单位的损伤,增加肠黏膜紧密连接蛋白表达来维持肠道通透性,从而对SAP大鼠肠黏膜屏障起到保护性作用。