背景:老年性骨质疏松症(Senile Osteoporosis,SOP)是增龄等综合因素引起的一种全身性骨病,随着人口老龄化的进展,老年性骨质疏松在世界各地发病逐年增高,其致死率和致残率高,已成为人类的重要健康问题,如何防治SOP也成为人类一项长期研究的重要课题。目的:检测SOP患者血清中核转录因子-K B(NF-K B)表达水平,探讨NF-κ B在SOP发病中的变化情况。构建SOP动物模型并应用龟板水提液干预,初步探讨龟板水提液对NF-κB通路的调控在SOP防治中的作用。方法:1、临床实验研究选取2017年8月至2018年9月在广州中医药大学第一附属医院脊柱骨科住院患者,分别收集SOP患者和对照组患者血液标本共40例,其中男性SOP组10例,男性对照组10例,女性SOP组10例,女性对照组10例,获取其血清样本,检测血清中NF-κ B的含量。2、动物实验研究(1)、小鼠SOP模型建立及鉴定80只8周龄雌性C57BL/J小鼠分成4组,假手术组(SHAM)、去卵巢组(OP)、衰老组(S)、模型组(SOP),每组各20只。OP组手术去除双侧卵巢;SHAM组参照OP组手术入路,切开腹腔后,在双侧卵巢周围各切除卵巢同体积大小的脂肪组织,闭合伤口;D-半乳糖组每日予皮下注射D-半乳糖溶液,SOP组于切除卵巢1周后,每日予皮下注射D-半乳糖溶液。分批于第4周、第8周、第12周记录小鼠一般状态及体重后取材,应用micro-CT检测腰2椎体骨微细结构、HE染色观察腰3椎骨形态结构及海马CA1区结构形态,评价SOP小鼠衰老及骨质疏松状况。(2)、基于NF-κ B信号探讨龟板水提液防治SOP的机制44只8周龄雌性C57BL/J小鼠分成4组,假手术组(SHAM)、模型组(SOP)、NF-κB抑制组(INH)、龟板治疗组(PTE),每组各1 1只。SHAM组切除少量腹腔脂肪;SOP组、INH组、PTE组参照实验一构建SOP模型,其中INH组于开始注射D-半乳糖溶液的同时予JSH-23灌胃;PTE组于开始注射D-半乳糖溶液的同时予龟板水提液灌胃。分别于第4周、第8周记录小鼠一般状态及体重后取材,应用micro-CT检测腰2椎体骨微细结构、HE染色观察腰3椎骨形态结构及海马CA1区结构形态,qPCR检测腰4椎体中NF-κB、TNFR2、ERa mRNA的表达水平。结果:1、临床实验研究SOP患者血清NF-κ B表达水平均明显高于对照组患者(P<0.05).2、动物实验研究(1)、小鼠SOP模型建立及鉴定①一般情况SOP组小鼠背部光秃,周边毛发稀疏无光泽,反应迟钝,动作迟缓,喜卧少动,饮食增加,右耳耳廓无光泽。②体重在造模后第4周(W4)、8周(W8)、12周(W12),SOP组体重均较SHAM组增加,且有统计学差异(P<0.05),W12时SOP组体重较SHAM组、OP组、S组均显著增高(P<0.05)。③腰椎骨微细结构W4时,与SHAM小鼠比较,SOP组BV/TV显著减少(P<0.05),SMI、Tb.Sp显著增大(P<0.05),W8时,与SHAM组比较,SOP组SMI、Tb.Sp显著增大(P<0.05),BV/TV、Tb.Th显著减小(P<0.05);W12时,与SHAM组比较,SOP组SMI、Tb.Sp显著增大(P<0.05),BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著减小(P<0.05)。④海马结构形态W8和W12时,SOP组海马CA1区神经元排列紊乱,细胞数目显著减少,神经元细胞萎缩,细胞间距明显增大。(2)、基于NF-κ B信号探讨龟板水提液防治SOP的机制①各组小鼠腰椎骨质疏松及海马结构形态改善情况W8,与SOP组比较,PTE组SMI显著减小,BV/TV显著增大(P<0.05),Tb.Th、Tb.N也稍有增大,Tb.Sp略有下降趋势。INH组、PTE组骨小梁连续性较SHAM稍差,与SOP组比较,视野内骨小梁增粗、增多,且连续性佳,骨小梁间隙明显变窄,海马CAI区海马神经元丰富,排列整齐,间距缩小。②各组小鼠腰椎骨组织NF-κ B、TNFR2、ERamRNA表达情况W8时,与SOP组比较,INH组、PTE组NF-κ B、TNFR2、ERa均呈下调趋势,且PTE组ERa mRNA表达显著下调(P<0.05)。结论:1、临床实验研究NF-κ B可能是介导SOP发病的重要因子。2、动物实验研究单纯去卵巢术或D-半乳糖注射,和去卵巢术联合D-半乳糖注射均能有效构建骨质疏松模型,而去卵巢术联合D-半乳糖注射更快构造SOP模型;NF-κ B转录活性可能是介导SOP发病的重要机制;龟板水提液能够有效改善小鼠SOP骨微细结构及骨形态结构,其机制可能与抑制NF-κ B的转录有关。