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麦穗鱼（Pseudorasbora parva）隶属于鲤形目（Cypriniformes），鲤科（Cyprinidae），麦穗鱼属（Pseudorasbora），为江河、湖泊、池塘等水体中常见的小型鱼类。缺氧诱导因子（hypoxia inducible factor）是存在于各种动物和人体内的一种重要转录因子，可介导机体为适应低氧条件而发生的一系列反应。麦穗鱼能在极低氧环境下生存，对研究其 HIF-1α的基因调控具有重要作用。 本论文以麦穗鱼为研究村料，研究内容主要分为4部分： 第1部分：通过 RT-PCR及RACE技术从麦穗鱼体内克隆获得 HIF-1α基因的cDNA序列，井对其核苷酸和编码的蛋白序列进行了生物信息学分析。 第2部分：以管家基因-actin作为内参分于，利用RT-qPCR方法对不同温度（18℃，8℃）条件下低氧（浓度）处理后麦穗鱼鳃中HIF-1α基因的mRNA表达水平进行了定量研究。 第3部分：对麦穗鱼 HIF-1α基因进行了原核表达，井以纯化后的HIF-1α重组蛋白免疫新西兰大白兔，制备了抗血清。 第4部分：以GAPDH为内参分于，通过 Western blot技术分析了8℃条件下低氧处理不同时间 HIF-1α蛋白的表达情况。 研究结果如下： （1）麦穗鱼 HIF-1α基因 cDNA序列全长3753 bp，包含一个长度为2325 bp的开放式阅读框（open reading frame, ORF），编码774个氨基酸残基，3端非编码区（3-UTR）长1224 bp，5端非编码区（5-UTR）长204 bp，推导的蛋白理论分于量为85.83 kD。同源性分析表明该基因与草鱼 Ctenopharyngodon idella的核苷酸序列相似性高达92％，蛋白序列间的相似性达97.8％。将该序列提交 GenBank，获得序列号为FJ794604。 （2）RT-qPCR结果表明，水温为8℃时，麦穗鱼鳃中HIF-1α基因在低氧刺激6 h时表达量最高，且与对照组具有显著性差异，24 h后恢复到对照组水平，48 h时表达量不变；水温为18℃时，低氧处理没有导致麦穗鱼鳃中HIF-1α基因表达的明显变化。 （3）利用原核表达系统成功实现了HIF-1α基因的重组表达。利用Ni柱进行亲和层析纯化得到目的蛋白，以纯化后的目的蛋白免疫新西兰大白兔制备 HIF-1α抗血清，最后 Western Blot结果表明此抗血清具有很好的特异性。 （4）Western blot实验结果表明，HIF-1α蛋白在缺氧6 h表达量明显升高，24 h表达量下降，但仍明显高于对照组，48 h后表达量进一步下降且低于对照水平。