银杏叶提取物对戊四氮点燃发育期大鼠学习记忆能力与海马突触重塑的影响

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liuliea
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目的:本实验主要探讨银杏叶提取物(EGb)的治疗疗程与发育期癫痫大鼠学习记忆能力的之间的关系,并进一步探讨EGb疗效与海马突触重塑的关系。   方法:21日龄SD大鼠随机分为生理盐水组(NS组)、PTZ点燃模型组,以戊四氮进行点燃模型的建立;模型建立后,模型组随机分为:点燃对照7天组(P7组)、点燃对照14天组(P14组)、EGb治疗7天组(E7组)、EGb治疗14天组(E14组)。E7组和E14组给予300mg/kg的EGb治疗7天和14天,在EGb治疗前后分别用Y型电迷宫检测大鼠学习记忆能力;采用免疫组化检测大鼠海马突触素(P38)及突触后致密物质(PSD95)阳性细胞数的数量及分布,用Western blot方法测大鼠海马P38及PSD95蛋白表达变化,采用电镜观察各组大鼠海马神经CA3区超微结构的变化。   结果:(1)EGb治疗前,21日龄大鼠,戊四氮(PTZ)点燃各组大鼠与NS组相比,达到学会标准所需的电击次数增多(P<0.05),PTZ点燃各组之间没有统计学差异(P>0.05)。EGb治疗后,P7组和P14组达到学会标准的次数较治疗前没有统计学差异(P>0.05),而E7组与E14组大鼠达到学会标准的次数均少于治疗前(P<0.05),但是E7组与E14组比较,达到学会标准的次数随EGb治疗时间的增加并无明显变化,且无统计学差异(P>0.05)。   (2)Western-blot中P38蛋白表达及定量分析结果:与NS组比较,各点燃对照组(P7组与P14组)大鼠海马P38的蛋白表达减少(P<0.05),E7组和E14组蛋白表达量较点燃对照组大鼠海马P38蛋白表达量增加(P<0.05)。P38免疫组化结果:21日龄SD大鼠海马区P7与P14组的P38免疫反应产物表达量较NS组减少(P<0.05),E7组及E14组较P7与P14组增加(P<0.05),且E7组和E14组之间有统计学差异(P<0.05)。   (3)Western-blot中PSD95蛋白表达及定量分析结果:与NS组比较,各点燃对照组(P7组与P14组)大鼠海马PSD95的蛋白表达减少(P<0.05),E7组和E14组蛋白表达量较P7组与P14组大鼠海马PSD95蛋白表达量增加(P<0.05)。PSD95免疫组化结果:21日龄SD大鼠海马区P7与P14组的PSD95免疫反应产物表达量较NS组减少(P<0.05);E7组及E14组较P7组与P14组增加(P<0.05),且E7组及E14组之间有统计学差异(P<0.05)。   (4)电镜超微结构:NS组的海马CA3区神经元形态及突触结构未见明显异常;P7组及P14组大鼠细胞及突触结构有损害;E7组、E14组较P7组及P14组有所改善,致密物较前稍增厚,仍未恢复至正常状态。   结论:PTZ点燃发育期癫痫大鼠学习记忆能力下降,且超微结结构有所损害;而EGb治疗可以改善癫痫大鼠的认知水平,并上调P38及PSD95的表达,改善突触超微结构,推测突触重塑可能参与了EGb改善认知的过程。
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