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目的:观察莪术醇对肝纤维化小鼠肝星状细胞Rho-ROCK信号通路的作用,探究其作用的分子机制。为莪术醇抗肝纤维化提供科学依据,为进一步开发与研究广西道地药材莪术抗肝纤维化提供了理论铺垫。方法:用生物信息学对肝纤维化和莪术进行深入分析。将KM小鼠分为三组,空白组、模型组、莪术醇组,用四氯化碳构建肝纤维化模型,用莪术醇对其进行灌胃处理。用HE和Masson染色观察肝脏结构的改变,使用自动分析仪检测肝纤四项和肝功能。对小鼠肝星状细胞进行培养,然后对其进行分组。先用MTT比色法测定各组细胞的增殖率,以此来确定莪术醇的高中低浓度,按照8个浓度梯度来进行。然后将细胞分为6组:空白对照组、模型组、阳性对照组、莪术醇低浓度组、莪术醇中浓度组,莪术醇高浓度组。实时荧光定量PCR检测RhoA和ROCK2mRNA的含量,免疫印迹检测RhoA和ROCK2的表达。结果:1.生物信息分析的结果:发现肝纤维化重要的靶点基因与Rho-ROCK信号通路关系密切;莪术发挥药理作用的通路上富集的基因与Rho-ROCK信号通路关系密切。2.肝纤维化模型的构建:空白组肝细胞,环绕汇管区成放射状排列,未见明显病理学改变,基本无胶原纤维生成;模型组肝细胞排列不规则,有空泡样改变,有胶原纤维沉积,纤维间隔变宽,可以看到明显的由纤维组织包绕肝小叶形成的假小叶;莪术醇组胶原沉积较少,肝组织病变较模型组改善。3.肝纤四项和肝功能指标:模型组和莪术醇组肝纤四项指标和肝功能指标均高于对照组,模型组两项指标又均高于莪术醇组,这种差异有统计学意义(P<0.05)。4.四氮噻唑蓝检测结果:设置莪术醇8个浓度梯度,除空白组外,均对细胞增殖有抑制作用。选择莪术醇1.5626ug/ml、3.1252ug/ml、6.2504ug/ml三个剂量作为莪术醇的低中高浓度组,因为这三组细胞增殖率较高。在这8组中,随着莪术醇浓度的增加,细胞的增殖率下降,增殖率与浓度有剂量关系,差异具有统计学意义(P<0.05)。5.实时荧光定量PCR检测结果:模型组RhoA和ROCK2mRNA的表达量均显著高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);阳性对照组RhoA和ROCK2mRNA的表达量均显著高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);莪术醇各组RhoA和ROCK2mRNA的表达量均显著低于模型组,而且这种差异存在明显的剂量依懒性,差异有统计学意义(P<0.05)。6.免疫印迹检测结果:模型组RhoA和ROCK2的表达明显高于空白对照组,并且差异具有统计学意义(P<0.05);阳性对照组RhoA和ROCK2的表达明显高于模型组,并且差异具有统计学意义(P<0.05);莪术醇各组RhoA和ROCK2的表达明显低于模型组,并且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Rho-ROCK信号通路与肝纤维化和莪术关系密切,莪术醇对肝纤维化KM小鼠模型有一定的抗肝纤维的作用,莪术醇对肝星状细胞Rho-ROCK信号通路有抑制作用,在一定的剂量范围内,这种抑制作用与剂量有剂量依赖性。