本研究以欧洲葡萄‘黑比诺’、‘红地球’、‘杨格尔’、‘赫什无核’、‘红宝石无核’、‘火焰无核’和‘无核白’7个不同残核大小的葡萄品种为材料,利用qRT-PCR技术分析葡萄ABC转运蛋白ABCG20基因在胚珠发育过程中的表达模式;分析VvABCG20基因在‘黑比诺’葡萄胚乳、种皮和胚珠中表达水平,确定该基因的组织特异性;同时分析了该基因在植物生长调节剂处理葡萄胚珠和叶片后的响应情况;进行了葡萄ABCG20蛋白亚细胞定位分析以及该基因在葡萄悬浮细胞和愈伤组织中的转运功能分析。主要得到以下研究结果:1、通过荧光定量PCR分析葡萄VvABCG20基因在7个不同残核大小葡萄品种胚珠发育中的表达量,发现其在残核大的葡萄胚珠中表达量高于残核较小的葡萄品种;将‘黑比诺’葡萄品种花后30 d和40 d的未硬化种子的种皮和胚乳分离开来,荧光定量PCR分析发现该基因在种皮中的表达量明显高于胚珠和胚乳;葡萄胚珠高表达基因VvABCG20基因在‘无核白’胚珠中对这植物生长调节剂GA3和CPPU的响应模式一致,即随着处理时间的延长,基因表达量不断增加;通过植物生长调节剂ABA、6-BA、GA3、Eth和MeJA喷施‘黑比诺’葡萄叶片,荧光定量PCR分析表明VvABCG20基因表达量主要在这五种植物生长调节剂处理12 h后增加。2、构建VvABCG20基因与GFP融合表达载体,瞬时转化烟草叶片,进行葡萄ABCG20蛋白亚细胞定位研究,通过共聚焦显微镜观察发现葡萄ABCG20蛋白定位于细胞质膜。3、以‘无核白’和‘黑比诺’葡萄无菌幼苗的茎段为材料,MS为基本培养基,含有0.3mg/L 6-BA和2.0 mg/L NAA的植物生长调节剂组合诱导了葡萄疏松型愈伤组织;以B5为基本培养基、0.5 mg/L 6-BA和1.0 mg/L 2,4-D植物生长调节剂配比及浓度、0.2%PVP的优化培养条件下,建立了快速稳定的‘无核白’葡萄细胞悬浮培养体系。4、通过适当浓度的肉桂酸衍生物(酚酸)、琥珀酸和丙三醇诱导物处理细胞后,荧光定量PCR分析表明VvABCG20基因表达量在顺式-阿魏酸、咖啡酸、香豆酸、琥珀酸和丙三醇五种物质处理后明显增加,甚至高达30倍,初步表明VvABCG20基因可以响应这五种物质的诱导。5、通过高效液相色谱法(HPLC)测定葡萄野生型和过量表达VvABCG20的转基因愈伤组织中酚酸含量,结果表明VvABCG20基因的高表达可以引起葡萄酚酸物质含量的变化;同时通过HPLC法测定顺式-阿魏酸、咖啡酸和香豆酸处理野生型和转基因愈伤组织后的酚酸含量,表明这三种肉桂酸衍生物的处理可以增加葡萄愈伤组织中其他酚酸的含量,同时转基因愈伤组织中增加的其他酚酸物质的含量高于野生型。因此,初步认为VvABCG20基因可能参与了葡萄酚酸物质的生物合成以及代谢过程。