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背景：自然杀伤T淋巴细胞(NKT细胞)是近年研究发现的一类有效的主要组织相容性复合体(MHC)非限制性抗肿瘤免疫效应细胞，对神经母细胞瘤(neuroblastoma，NB)有杀伤作用。由于人体内NKT细胞数量少，活性低，使其发挥作用受到限制，因此，有必要寻找新的刺激物以有效激活NKT细胞。本实验选用细胞因子IL—15和GM—CSF，以及从NB细胞内提取出的脂类粗提物作为刺激物，观察其对NKT细胞的激活作用。 方法：首先采集并分离健康儿童外周血T细胞，分别加入IL-15、GM—CSF培养，MTT法检测T细胞增殖程度的变化，流式细胞仪检测NKT／T比例并分选出NKT细胞，MTT法检测NKT细胞对NB细胞毒作用。然后用甲醇／氯仿法提取神经母细胞瘤脂类粗提物作为刺激物，采集健康儿童和NB病人外周血单核细胞，加入IL—4／GM—CSF培养出成熟的树突细胞，采集并分离同一个体外周血T细胞与树突细胞共同培养，分别加入脂类粗提物和IL—15／GM-CSF，测定各组T细胞增殖程度、NKT／T比例和NKT细胞对NB细胞毒作用。 结果：1．单用IL—15和GM—CSF均能促进健康儿童外周血T细胞增殖和增高NKT／T比例，单用GM—CSF能增强NKT细胞毒作用，单用IL—15不能增强NKT细胞毒作用；与GM-CSF组比较，联用IL—15和GM—CSF T细胞增殖程度增高但NKT／T比例和NKT细胞毒作用差异无显著性：与IL—15组比较，IL—15／GM—CSF组NKT细胞毒作用增高但T细胞增殖程度和NKT／T比例差异无显著性。2．肿瘤脂类粗提物能促进健康儿童和NB病人外周血T细胞增殖、增高NKT／T比例和增 4W—————— 强NKT细胞毒作用；肿瘤脂类粗提物与细胞因子几－15／GM－CSF联合应用（共 刺激组）与肿瘤脂类粗提物刺激组和IL－15／GM－CSF刺激组比较T细胞增殖程 度、NKT／T比例和NKT细胞毒作用均增高。3．与健康儿童组比较，NB病人外 周血NKT／T比例、对肿瘤脂类粗提物与细胞因子几－15／GM－CSF等刺激物的反、应差异无显著性。 结论：1．IL－15和GM－CSF联合应用可以促进健康儿童外周血NKT细胞增 殖，增强NKT细胞对NB细胞毒作用；2．神经母细胞瘤脂类粗提物可以有效激 活健康儿童和NB病人外周血NKT细胞，发挥对自身肿瘤细胞的细胞毒作用； 3．IL－15／GM－CSF可以增强脂类粗提物的激活作用。