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木犀草素特殊的结构赋予它具有清除自由基的抗氧化活性,有关药理及临床试验的结果表明木犀草素具有抑制癌细胞增殖、抗肿瘤、降低血脂的良好作用,因而近年来国内外对其开发研究非常活跃。近年来有文献报道金银花中含有木犀草素,在2005版的中华人民共和国药典中已将木犀草素列入金银花药材必须检测的指标。此外,金银花中绿原酸含量丰富,具有重要的药用价值。湖南是80年代初发展起来的金银花栽培的新产区,现已成为全国最大的金银花产区之一,金银花产业已具规模,从金银花中提取木犀草素和绿原酸是金银花综合开发利用的重要途径之一。本研究以金银花为研究对象,建立金银花中木犀草素的高效液相色谱法(HPLC)检测方法;对金银花中木犀草素、绿原酸的提取与分离纯化工艺进行系统的研究,确定了工艺流程和分离纯化条件。主要研究结果如下:1.建立了HPLC定量检测木犀草素含量的方法,其色谱条件为:色谱柱C18(250mm×4.6mm,5um),检测波长350nm,柱温25℃,进样量20μL,流速0.8mL/min,以甲醇-0.3%H3PO4溶液(55:45-70:30,15min)为流动相的梯度洗脱。在此色谱条件下,金银花样品液中目标峰与杂质得到较好地分离。木犀草素在0.05μg/mL-10μg/mL浓度范围内线性关系良好。2.通过单因素试验和正交试验,优化金银花中木犀草素的加热回流提取工艺,确定最佳工艺参数。结果表明,影响木犀草素提取效率的各因素主次顺序是:料液比>提取温度>乙醇浓度>碱液浓度>提取时间,料液比、提取温度、乙醇浓度对提取效率的影响显著。综合分析确定金银花中木犀草素的提取条件为:提取温度90℃、液料比为25:1、乙醇浓度60%、氢氧化钠溶液浓度0.1mol/L,提取时间2.0h,重复提取三次,木犀草素含量为48.354μg/g。3.通过单因素试验和正交试验,优化金银花中绿原酸的加热回流提取工艺,确定了最佳工艺参数。结果表明,影响绿原酸提取效率的各因素主次顺序是:乙醇浓度>料液比>提取时间>提取温度。综合分析确定金银花中绿原酸的提取条件为:提取温度70℃、液料比为10:1、乙醇浓度70%、提取时间1.0h,绿原酸含量为105.277mg/g。4.建立了金银花提取液中木犀草素与绿原酸的纯化工艺研究。比较8种大孔树脂对木犀草素的吸附分离特性,确定选择101大孔树脂。纯化条件为:上样液为pH5,洗脱液为pH9的70%乙醇、上样流速为1BV/h、洗脱流速为2BV/h,洗脱液用量约为3 BV,在该条件下木犀草素含量提高到3.96mg/mL。而绿原酸的含量提高到了321.205 mg/mL。