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全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)已被证实具有有效诱导分化及抑制肿瘤细胞生长的作用,其对肺癌的防治作用正日益受到广大学者的重视。但国外最近应用ATRA前体—β-胡萝卜素保护肺癌高风险人群的两个大样本实验研究却发现:高剂量的β-胡萝卜素摄入,非但不能保护吸烟及接触石棉的人群,反而增加其发生肺癌的风险[1];有证据表明ATRA具有刺激血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)基因转录及蛋白表达的作用[2];另外尚存在ATRA有效作用剂量大、有较大的毒副反应以及某些肿瘤对其具有抗药性等问题,这些缺点制约了ATRA的实际应用价值。5,7,4’-三羟异黄酮(Genistein)是一种天然的酪氨酸蛋白激酶抑制剂,其抗癌作用近年来倍受关注。一定剂量的Genistein既能诱导肿瘤细胞分化又具有促其凋亡的作用,但单独使用Genistein对肿瘤细胞的诱导分化和促凋亡作用均较弱。因此,研究如何既能减低抗瘤药物剂量、以减轻其毒副作用,又能增强或不减弱药物的抗肿瘤效果就显得十分重要;有学者就认为探索低剂量多药联合应用,是肿瘤药物治疗研究的一个十分重要的方向[3]。本课题拟通过比较ATRA或Genistein单药与两者联合使用对A549人肺腺癌细胞株增殖、凋亡及VEGF表达的影响,验证联合用药较之单独用药是否在增强药物抗肿瘤效果的同时,降低促进VEGF基因转录、蛋白表达以及可能的促肿瘤血管生成的潜在风险;在此基础上,进一步研究联合使用ATRA和Genistein对凋亡相关基因Bcl-2、Bax以及细胞周期相关分子pRb、CDK4、Cyclin D1等表达的调节作用,探讨ATRA联合Genistein增强抗肿瘤效应的分子机制。研究目的1、通过研究ATRA联合Genistein对A549人肺腺癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,验证联合用药在抑制A549细胞增殖及促其凋亡方面的协同作用;2、通过研究ATRA联合Genistein对A549人肺腺癌细胞凋亡相关基因及细胞周期相关分子表达的影响,探讨联合用药对A549细胞凋亡及细胞周期影响的分子机制;3、通过研究ATRA联合Genistein对A549人肺腺癌细胞ICAM-1、MUC1及VEGF表达的影响,探讨联合用药对A549细胞侵袭、转移潜能的影响,为ATRA联合Genistein