抑抗汤对胚泡着床障碍的改善作用及作用机制

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目的:观察抑抗汤对小鼠胚泡着床障碍的改善作用及其作用机制。方法:将小鼠随机分为正常组,模型组(米非司酮胚泡着床障碍模型组),中药组(米非司酮+抑抗汤组)和对照组,中药组按照抑抗汤灌胃剂量进一步分为低、中、高剂量中药组,分别每日以0.4ml(5g/kg/d)、0.6ml(7.5g/kg/d)、0.8ml (10g/kg/d)剂量的抑抗汤灌胃,对照组每日灌胃生理盐水0.8ml,28天后交配。模型组小鼠于妊娠第4天(D4)10:00皮下注射浓度0.8g/L米非司酮溶液0.1ml(0.08mg/只)建立小鼠胚泡着床障碍的动物模型,中药组于D4同一时间段皮下注射浓度0.8g/L米非司酮溶液0.1m1。所有小鼠于妊娠第五天(D5)10:00尾静脉注射0.5%伊文思蓝溶液0.1ml,15min后颈椎脱臼处死,观察小鼠妊娠率和子宫平均胚泡着床数。用ELISA法检测小鼠宫腔冲洗液内LIF蛋白水平,实时荧光定量PCR (real-time RT PCR)检测子宫内膜ERa、PR和LIF mRNA表达水平。结果:模型组妊娠率和平均胚泡着床数较正常组明显下降(P<0.01),中药组妊娠率和平均着床胚泡数均较模型组增加(P<0.05),呈剂量依赖性,低、中剂量中药组平均着床胚泡数仍低于正常组(P<0.05),高剂量中药组平均胚泡着床数与正常组无明显统计学差异。中药组ERa mRNA水平与模型组和正常组无明显差异,而PRa和LIF mRNA高于模型组(P<0.05),其中高剂量中药组LIF蛋白和PRa、LIF mRNA水平不仅高于模型组,且PRa和LIF mRNA水平较正常组升高。结论:抑抗汤能够调节着床期间雌孕激素受体在子宫内膜上的协调表达,促进白血病抑制因子的表达,改善子宫内膜微环境和增加子宫内膜容受性,从而改善胚胎着床障碍,在治疗胚胎着床障碍性不孕症中可能发挥重要的作用。
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