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背景与目的:活禽零售市场是禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)积聚、进化和传播的重要环节,是人感染禽流感的高风险场所,引发了严重的公共卫生问题。为维护公共卫生安全,降低人感染禽流流感的风险,促进活禽生产经营业转型升级,广州市于2014年5月在部分区域开展了家禽“集中屠宰、冷链配送、生鲜上市”的先行试点工作,于2017年8月扩大了活禽限制区。目前对生鲜上市措施的评价鲜有研究报道,且少数报道的研究仅根据短期的市场环境物体表面AIV的监测数据,缺乏长期系统的物体表面AIV监测和空气AIV污染情况的科学数据。本研究旨在了解活禽零售市场和生鲜禽市场中环境物体表面和空气AIV及H5、H7、H9亚型、Hmix(H5、H7、H9任意两种或三种亚型混合毒株)在不同季节和不同区域的污染情况;比较物体表面和空气AIV及H5、H7、H9、Hmix在活禽零售市场与生鲜禽市场中核酸阳性率的差异,评价生鲜上市措施的效果,为政府制定进一步扩大活禽经营限制区的决策提供科学依据。方法:于2018年1月～12月对广州市的活禽零售市场和生鲜禽市场进行物体表面监测和空气监测。物体表面监测采用分层整群抽样方法在广州市190家社区卫生服务中心(镇卫生院)的辖区内随机抽取活禽零售市场和生鲜禽市场各1个进行采样,采集的物体表面标本种类包括:地表污水、污物桶、禽笼具、脱毛机、砧板刀具、冰柜和禽肉的表面或内壁表面涂抹擦拭物;空气监测采用非概率抽样方法在广州市活禽零售市场和生鲜禽市场各选择3个作为监测点,空气标本采样的区域包括:活禽存栏区,活禽宰杀脱毛区,生鲜禽加工区,售卖区及档口前过道区。采集的物体表面标本和空气标本通过实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)方法进行检测,检测出AIV核酸阳性的标本进一步进行H5、H7、H9亚型检测。采用?(17)检验或Fisher精确概率法对不同类型市场的物体表面涂抹标本和空气标本的AIV及其亚型阳性率进行比较。采用Bonferroni法进行两两比较。统计分析运用SAS 9.4软件完成。结果:1.活禽零售市场与生鲜禽市场物体表面标本AIV检测结果:(1)活禽零售市场:共采集物体表面涂抹标本7580份,AIV阳性标本2288份(30.18%),其中H5 281份(3.71%)、H7 22份(0.29%)、H9 1599份(21.09%)和Hmix 190份(2.51%)。第一季度的物体表面涂抹标本AIV阳性率最高,为35.03%,各季度阳性率差异有统计学意义(?(17)=98.49,P<0.01)。H5、H9和Hmix均在第四季度达到最高值,H7阳性率各季度处于较低水平。地表污水和脱毛机物体表面涂抹标本AIV阳性率较高,分别为36.76%和35.09%,不同类型标本阳性率差异有统计学意义(?(17)=80.33,P<0.01)。经两两比较,脱毛机内壁涂抹标本H5、H7、H9和Hmix阳性率最高(P<0.005)。(2)生鲜禽市场:共采集物体表面涂抹标本6100份,AIV阳性标本1242份(20.36%),其中H5 145份(2.38%)、H7 5份(0.08%)、H9 676份(11.08%)和Hmix 63份(1.03%)。第一季度的物体表面涂抹标本AIV阳性率(26.69%)高于其余季度,各季度阳性率差异有统计学意义(?(17)=159.03,P<0.01)。H5和Hmix阳性率在第四季最高,H9阳性率在第一季度最高,H7阳性标本各季度检出率低。地表污水物体表面涂抹标本AIV阳性率最高,为28.42%,不同类型标本阳性率差异有统计学意义(?(17)=127.73,P<0.01),两两比较发现,地表污水标本H5、H9和Hmix阳性率最高(P<0.005)。2.活禽零售市场与生鲜禽市场空气标本AIV检测结果:(1)活禽零售市场:共采集空气标本288份,AIV阳性标本38份(13.19%),其中H5 1份(0.35%)、H7 1份(0.35%)、H9 8份(2.78%)和Hmix0份。第四季度的空气标本AIV阳性率最高,为25.00%,各季度阳性率差异有统计学意义(?(17)=21.71,P<0.01),H5、H7、H9阳性率均在第一季度最高。在活禽存栏区采集的空气标本AIV阳性率(27.78%)最高,不同区域标本阳性率差异有统计学意义(?(17)=29.47,P<0.01)。H5、H7阳性仅在活禽宰杀脱毛区标本检出,两两比较发现,活禽存栏区空气标本H9阳性率最高(P<0.008)。(2)生鲜禽市场:共采集空气标本288份,AIV阳性标本12份(4.17%),其中H5、H7、H9和Hmix均为0份。第一季度的空气标本AIV阳性率(8.33%)高于其余季度,各季度阳性率差异有统计学意义(P=0.02)。在生鲜禽加工区采集的空气标本AIV阳性率最高,为9.38%,不同区域空气标本阳性率差异有统计学意义(P=0.01)。3.活禽零售市场与生鲜禽市场物体表面涂抹标本和空气标本AIV阳性率比较:活禽零售市场的物体表面涂抹标本总体AIV阳性率(30.18%)高于生鲜禽市场(20.36%),差异有统计学意义(?(17)=170.38,P<0.01);活禽零售市场的物体表面涂抹标本H5、H7、H9和Hmix阳性率分别为3.71%、0.29%、21.09%和2.51%,高于生鲜禽市场的2.38%、0.08%、11.08%和1.03%,差异均有统计学意义(?(17)=19.82、7.44、244.42和40.45,均P<0.01)。活禽零售市场空气标本总体AIV阳性率(13.19%),高于生鲜禽市场(4.17%),差异有统计学意义(?(17)=14.81,P<0.01);活禽零售市场空气标本H9阳性率(2.78%)高于生鲜禽市场(0%),差异有统计学意义(P<0.01),活禽零售市场空气标本检出H5和H7阳性均为1份,而生鲜禽市场空气标本均未检出。结论:活禽零售市场与生鲜禽市场AIV污染情况存在季节性差异,春冬季污染严重,需重点加强冬春季市场环境物体表面和空气AIV监测评估,并指导市场管理部门做好相关防控措施。活禽零售市场采集的物体表面涂抹标本和空气标本AIV及H5、H7、H9、Hmix核酸阳性率均高于生鲜禽市场,施行生鲜上市措施能有效减少环境物体表面和空气AIV的污染。另外,活禽零售市场空气AIV污染需引起高度关注,增加空气AIV的监测对于人感染禽流感的风险预警和防控具有重要的公共卫生意义。