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目的: 探究单克隆抗体(D2-40)、肾小球足突细胞膜黏蛋白(podoplanin)、人类肺组织特异性基因(LUNX mRNA)、上皮癌相关基因(KS1/4)检测在非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)微转移中的临床意义。 方法: 随机收集100例临床非小细胞肺癌患者,其中34例患者出现淋巴结转移,66例患者未出现淋巴结转移,通过随访后把66例患者分为两组,出现肿瘤局部复发或远处转移的病例称为复发组,没有发现肿瘤复发或转移的病例称为无复发组,复发组有23例,无复发组有43例。30例肺部良性疾病患者(良性肿瘤,支气管扩张症等)作为对照组。选用免疫组织化学方法检测D2-40及podoplanin在实验组和对照组患者淋巴结中的表达,通过RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction逆转录-聚合酶链式反应)测试KS1/4 mRNA、LUNX mRNA在实验组和对照组患者淋巴结中的表达。 结果: D2-40在NSCLC患者复发组、无复发组与肺部良性病变组MLVD的计数分别为(12.67±2.06)、(9.53±2.04)、(4.83±2.02),D2-40在非小细胞肺癌复发组、无复发组、对照组中MLVD呈递减关系,说明D2-40标记的淋巴管数量呈递减趋势,复发组中D2-40标记的淋巴管高于无复发组及对照组,差异有统计学意义(P<0.01);同样,Podoplanin标记的LVD的计数分别为(18.12±2.28)、(13.48±2.16)、(9.93±2.10),复发组淋巴结中Podoplanin标记的LVD高于无复发组及对照组,差异有统计学意义(P<0.01);非小细胞肺癌与肺部良性病变淋巴结组织中LUNX mRNA的RQ均值在复发组、无复发组及对照组呈递减关系,说明其LUNX mRNA的表达量呈递减趋势,复发组中LUNX mRNA的表达量高于无复发组及对照组,差异有统计学意义( P<0.01);同样,KS1/4 mRNA在复发组淋巴结中的表达量高于无复发组及对照组,差异有统计学意义(P<0.01),其中,LUNX mRNA表达量明显高于KS1/4 mRNA的表达。同时,在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期NSCLC患者淋巴结中D2-40标记的淋巴管数分别为(8.43±1.89)、(9.36±1.92)、(11.58±1.95),Podoplanin标记的淋巴管数分别为(12.28±2.05)、(14.13±2.08)、(17.49±2.13),LUNX mRNA的RQ均值分别为(2.78±2.86)、(3.65±3.78)、(4.82±4.91),KS1/4 mRNA的RQ均值分别为(1.23±1.14)、(1.48±1.36)、(1.76±1.65),说明D2-40、Podoplanin及LUNX mRNA、KS1/4 mRNA表达的阳性率与TNM临床分期密切相关(P<0.05),分期越晚,以上因子的表达越强。而且,通过普通病理与RT-PCR法检测LUNX mRNA表明,RT-PCR法比普通病理检测有更高的敏感性,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: D2-40、podoplanin、Lunx mRNA、KS1/4 mRNA均是检测NSCLC淋巴微转移的理想标记物。Lunx mRNA、KS1/4 mRNA都可作为RT-PCR检测NSCLC患者淋巴结微转移的分子标记物,但在特异性和敏感性上,前者优于后者。同时,淋巴结中D2-40、Podoplanin及LUNX mRNA、KS1/4 mRNA表达与非小细胞肺癌患者分期密切相关,有一定的临床意义。RT- PCR检测Lunx mRNA、KS1/4 mRNA是一种敏感特异地检测肺癌淋巴结微转移的方式,与普通的病理切片检查判定NSCLC淋巴结微转移比较,RT-PCR法有较高的敏感性。